吡格列酮对ApoE-/-糖尿病小鼠肾脏NLRP3炎症小体表达的影响及机制

摘要

[目的]
　　NLRP3炎症小体的激活参与了糖尿病肾病的发生和发展。吡格列酮(pioglitzone PIO)在糖尿病患者的治疗过程中，表现出了显著的抗炎作用，我们通过观察吡格列酮对载脂蛋白E基因敲除（ApoE-/-）糖尿病小鼠NLRP3炎症小体表达的影响来评价吡格列酮在糖尿病肾病的治疗作用以及可能的机制。
　　[方法]
　　将48只ApoE-/-小鼠随机分为4组:分别为ApoE-/-组，ApoE-/-+吡格列酮治疗组，糖尿病ApoE-/-组，和糖尿病ApoE-/-吡格列酮治疗组。选择8只C57BL/6小鼠作为对照组，吡格列酮治疗组给予PIO治疗8周后，摘眼球取全血测血糖(GLU)胆固醇(CHO)、甘油三脂(TG)、尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)。提取小鼠肾皮质总蛋白，用Western blot检测晚期糖基化终产物自身受体(RAGE)、核因子NF-κB的变化情况。做肾组织石蜡切片进行PAS染色，免疫组化染色评价晚期糖基化终产物自身受体(RAGE)、核因子NF-κB、NLRP3、caspase-1，白细胞介素(IL)-18，IL-1β的变化情况。
　　[结果]
　　1.与糖尿病ApoE-/-小鼠组和非糖尿病ApoE-/-小鼠组对比，PIO治疗后可显著降低血糖，血胆固醇、血肌酐、尿素氮水平，PIO不仅可以改善血糖血脂的代谢，还可以改善糖尿病导致的肾功能下降。
　　2.通过PAS染色证实:PPARγ激动剂PIO可以抑制肾小球系膜细胞增殖，减轻糖尿病性肾脏组织损害。
　　3.通过ELLISA法检测肾组织中AGEs，Western blot、免疫组化检测RAGE，证实PPARγ激动剂PIO可以直接抑制肾组织中AGEs/RAGE轴的激活，减少肾组织ROS的产生。
　　4.Western blot以及免疫组化检测肾组织内炎症因子NF-κB的表达显示:PPARγ激动剂PIO可以抑制NF-κB的活化。
　　5.免疫组化检测肾组织内NLRP3炎症体及下游炎症因子的表达显示:PPARγ激动剂PIO可以抑制NLRP3炎症体的活化，抑制炎症体下游炎症因子caspase-1，IL-18和IL-1β的分泌及释放。
　　[结论]
　　吡格列酮治疗可通过抑制肾组织中AGEs/RAGE轴的过度活化以及NF-组织的表达，从而抑制肾组织内NLRP3炎症体的激活来保护肾脏，进而改善糖尿病性肾病的组织损害，该研究结果为阐明吡格列酮的肾脏保护机理提供新的实验依据。

目录

摘要

论文说明

中英文对照缩略词表

前言

材料与方法

一、动物实验

二、病理实验(PAS染色、免疫组化(Immunohistochemistry IHC))

三、酶联免疫吸附法实验(ELLSA)

四、蛋白印记实验(western blot WB)

五、统计学方法

2 各组小鼠生化指标的对比

3． 吡格列酮对肾小球系膜增殖的影响

4．吡格列酮对肾脏AGE／RAGE轴的影响

5．PIO对肾实质内NF-κB信号通路的影响

6．PIO对NLRP3炎症小体相关炎症因子表达的影响

讨论

结论

参考文献

综述 NLRP3炎症体与肾脏疾病的研究进展

致谢

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