ICP患者血清及胎盘组织中CD83+DCs、CD1a+DCs、IL-17及IL-35的表达及临床意义

摘要

目的:
　　通过检测妊娠期肝内胆汁淤积症(ICP)患者以及正常妊娠妇女血清以及胎盘组织中不同成熟状态的树突细胞(CD83、CD1a)表达的数量以及IL-17和IL-35的表达水平的变化，分析其相关性及与疾病严重程度的相关性，探讨妊娠期肝内胆汁淤积症的免疫发病机制，有助于临床诊疗工作的进展。
　　方法:
　　采用病例对照研究方法，选取2015年1月至2016年7月在苏北人民医院及扬州市妇幼保健院产科分娩的正常妊娠孕妇30例为对照组，以及30例轻度ICP组和25例重度ICP组，均以剖宫产方式终止妊娠，三组在年龄、民族、孕产次等方面均无统计学差异，并排除其他内外科合并症，ICP的诊断标准依据中华医学会发表的《妊娠期肝内胆汁淤积症诊疗指南(2015)》。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)及免疫组化SP法分别检测血清和胎盘组织中CD83、CD1a、 IL-17以及IL-35的表达，采用SPSS17.0对结果进行统计学分析，P＜0.05为有统计学差异。
　　结果:
　　(1)通过酶联免疫吸附试验的结果发现，CD83+DCs、CD1a+DCs在正常对照组、轻度ICP组及重度ICP组孕妇血清中的表达无显著性差异（P＞0.05）。
　　(2)ICP患者血清中的IL-17的表达水平显著高于对照组，差异具有统计学意义(P＜0.05)，重度ICP组血清中IL-17的水平显著高于轻度ICP组，差异具有统计学意义（P＜0.05）。ICP患者血清中的IL-35的表达水平显著低于对照组，差异具有统计学意义(P＜0.05)，重度ICP患者血清中IL-35的水平显著低于轻度ICP组，差异具有统计学意义（P＜0.05）。
　　(3)IL-17、IL-35在正常对照组、轻度ICP组及重度ICP组孕妇血清中的表达存在负相关性（P＜0.05），而其与其他因子之间无相关性(P＞0.05)。
　　(4)CD83+DCs主要分布于蜕膜组织中靠近腺体上皮的间质中。三组间CD83+DCs的形态和分布无明显区别，但数量在三组间的差异具有统计学意义。ICP组胎盘组织中CD83+DCs表达水平显著高于对照组，差异具有统计学意义(P＜0.05);轻度ICP患者胎盘组织中的CD83+DCs表达强度高于对照组(P＜0.05);重度ICP组胎盘组织中CD83+DCs的表达强度显著高于轻度ICP组，差异具有统计学意义(P＜0.05)。
　　(5)CD1a+DCs主要分布于蜕膜组织中靠近腺体上皮的间质中。三组间CD1 a+DCs的形态和分布部位无明显区别，数量具有统计学差异。ICP组胎盘组织中CD1a+DCs表达水平显著低于对照组，差异具有统计学意义(P＜0.05);轻度ICP患者胎盘组织中的CD1a+DCs表达强度低于对照组(P＜0.05);重度ICP组胎盘组织中CD1a+DCs的表达强度显著低于轻度ICP组，差异具有统计学意义(P＜0.05)。
　　(6)IL-17在胎盘组织中的滋养层细胞及蜕膜均有表达，三组间的表达水平存在统计学差异，ICP组表达水平明显高于对照组，其在重度ICP组胎盘组织中的表达水平高于轻度ICP组，在轻度ICP组胎盘组织中的表达水平高于对照组(P＜0.05)。
　　(7)IL-35在胎盘组织中的滋养层细胞及蜕膜均有表达，三组间的表达水平差异具有统计学意义，ICP组表达水平明显低于对照组，其在重度ICP组胎盘组织中的表达水平低于轻度ICP组，在轻度ICP组胎盘组织中的表达水平低于对照组(P＜0.05)。
　　(8)CD83+DCs与CD1a+DCs、IL-35在正常对照组、轻度ICP组及重度ICP组孕妇胎盘组织中的表达存在负相关性;CD83+DCs与IL-17的表达成正相关;CD1a+DCs与IL-17的表达存在负相关性;CD1a+DCs与IL-35的表达成正相关;IL-17与IL-35的表达成负相关（P＜0.05）。
　　(9)血清和胎盘中CD83+DCs与CD1a+DCs的表达不存在相关性(P＞0.05);血清中IL-17的表达和和胎盘中IL-17的表达成正相关(P＜0.05);血清中IL-35的表达和胎盘中IL-35的表达成正相关(P＜0.05)。
　　结论:
　　(1)CD83+DCs在ICP患者体内表达上升，CD1a+DCs在ICP患者体内表达下降。
　　(2)IL-17在ICP患者体内表达加强，IL-35在ICP患者体内表达减弱。
　　(3)四个因子在ICP患者体内的表达存在一定的相关性，表明免疫炎症因素参与ICP的发生。

目录

摘要

符号说明

前言

实验材料与方法

1．研究对象

2．标本采集

2．1 血清

2．2 胎盘

3．仪器及试剂

3．1 主要实验设备、仪器

3．2 主要购买的试剂

3．3 重要试剂的配制

4．实验方法与步骤

4．1 酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immuno sorbent assay，ELISA)实验方法及步骤

4．2 免疫组织化学实验方法及步骤

5．结果判读

5．1 ELISA结果判读

5．2 免疫组化结果判读

6．统计学处理

实验结果

1．三组研究对象之间临床资料的比较

2．CD83+DCs、CD1a+DCs在正常对照组和ICP患者(轻度及重度)外周血中的表达

3．IL-17在正常对照组和ICP患者(轻度及重度)外周血中的表达

4．IL-35在正常对照组和ICP患者(轻度及重度)外周血中的表达

5．CD83+DCs、CD1a+DCs、IL-17及IL-35在正常对照组和ICP患者(轻度及重度)外周血中表达的相关性

6．CD83+DCs在正常对照组和ICP患者(轻度及重度)胎盘中的定位及定量表达

7．CD1a+DCs在正常对照组和ICP患者(轻度及重度)胎盘中的定位及定量表达

9．IL-35在正常对照组和ICP患者(轻度及重度)胎盘中的定位及定量表达

11．CD83+DCs、CD1a+DCs、IL-17及IL-35在血清和胎盘中表达的相关性

讨论

1．DCs与ICP

1．1 DCs基本生物学特征

1．2 DCs与免疫耐受

1．3 DCs与ICP

2．2 IL-17与妊娠

2．3 IL-17与ICP

3．2 IL-35与妊娠

4．DCs、IL-17、IL-35的相互关系与ICP

5．展望与不足

结论

参考文献

附录

综述 妊娠期肝内胆汁淤积症免疫因素的研究进展

致谢

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