枯否氏细胞NF-κB活性在肝损伤中的作用机制

摘要

目的:了解重组TNFα刺激下的培养肝脏枯否氏细胞NF-κB活性的时程性变化及不同剂量重组TNFα对枯否氏细胞NF-κB活性的作用规律,观察地塞米松对枯否氏细胞NF-κB活性及其调控的细胞因子TNFα的影响,明确NF-κB活性在肝损伤中的作用.方法:原位灌注消化Spraqae-Dawley大鼠肝脏,应用不同离心力获取肝脏非实质细胞,不连续密度梯度离心、选择性贴壁分离肝脏枯否氏细胞,培养、-80℃冻存.取0.5-1.0×10<'7>/ml浓度进行实验分组,包括对照组6孔,重组TNFα终浓度为10ng/ml刺激,按时点0,0.5小时,1小时,2小时,4小时,6小时,8小时共分7亚组,每组各6孔,不同浓度重组TNFα刺激2小时按0ng/ml,5ng/ml,10ng/ml,20ng/ml,50ng/ml,100ng/ml共6亚组,每组各6孔,10ng/ml亚组预先加入2mg/L地塞米松保护共6孔,重组TNFα10ng/ml刺激2小时组取培养基行TNFαELISA检测,所有各组收集细胞核抽提后行NF-κBELISA检测.结论:重组TNFα可刺激肝脏枯否氏细胞NF-κB活性增高,具有浓度依赖性的特点,NF-κB活性的时程性升高在2小时之前,表明其调控炎症介质是个早期事件,地塞米松可抑制NF-κB活性并下调其调控的核心细胞因子分泌.

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文摘

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前言

一、对象与方法

二、结果

三、讨论

四、结语

五、问题与展望

六、参考文献

枯否氏细胞NF-κB活性和肝脏损伤

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