OX40转基因细胞的构建及鼠抗人OX40激发型单克隆抗体的研制

摘要

OX40(CD134)是分子量为50kD的I型跨膜糖蛋白,属TNFR超家族成员,主要表达于活化的CD4<'+>T细胞表面,CD8<'+>T表面也有少量表达.人OX40L主要表达于成熟的树突状细胞(DC)、活化的B细胞、血管内皮细胞(VEC)、脐带静脉血管内皮细胞(HUVEC)、巨噬细胞以及某些组织器官包括心、骨骼肌、睾丸和肺等.OX40/OX40L介导的共刺激信号,参与了T细胞的活化、增殖和迁移,维持T细胞的长期生成,以及协同CD28信号促进生发中心的形成.CD28/B7主要在初次免疫应答中起作用,而OX40/OX40L信号在初次免疫的后期,二次免疫应答及免疫记忆中发挥重要的调节效应.同时OX40L还能介导逆向共刺激信号,协同CD40信号诱导DC进一步分化成熟;在内皮细胞上,OX40L逆向信号能上调表达趋化因子RANTES/CCL5.由于OX40主要表达在炎症部位的抗原特异性T细胞上,使其成为一个理想的免疫干预的靶分子,有望通过在体内阻断OX40/OX40L的相互作用或消除OX40<'+>T细胞来减弱自身免疫性疾病及移植排斥反应,而应用激发型抗OX40的单抗来增强OX40信号、促进细胞因子的分泌和增加抗原特异性记忆细胞的数量,从而提高机体抗肿瘤的能力.综上所述,该研究成功克隆了编码人OX40分子的cDNA片断,构建了能稳定表达人OX40分子的转基因细胞,初步探讨了该转基因细胞对DC的促分化作用,证明了表达在DC表面的OX40L分子能介导逆向共刺激信号;成功研制出能稳定和特异分泌抗人OX40激发型单克隆抗体的杂交瘤细胞株,初步探讨了该单抗对活化T细胞的刺激作用,证明该单抗在体外可进一步扩增活化的T细胞,这可能是通过上调表达IL-2而起作用.并且该单抗能促进T细胞上调表达IFN-γ,下调表达IL-10,促使其向Th1方向分化.

目录

文摘

英文文摘

苏州大学学位论文独创性声明及使用授权声明

缩写词表

研究背景

第一部分人0X40转基因细胞株的建立及其对DC促分化作用的研究

第二部分鼠抗人OX40(CD134)功能性单克隆抗体的制备及生物学特性鉴定

小结与展望

研究生学习期间发表的文章

本课题的受资助情况

致谢

附录