鼠抗人CD28分子功能性单克隆抗体的研制及其生物学特性的研究

摘要

对该信号进行选择性调控,可促使机体对肿瘤的排斥和肿瘤细胞的杀伤,有助于自身免疫性疾病或超敏反应及异体器官移植排斥的防治.另外,可溶性CD28分子在免疫应答和免疫调节中发挥何种作用,在肿瘤、免疫缺陷病、自身免疫疾病和器官移植等疾病的发生、发展、转归中又有何意义,目前仍不清楚.因此,CD28功能性单克隆抗体的研制及可溶性CD28分子检测方法的建立,为CD28及相关协同刺激分子的基础研究和肿瘤、移植排斥反应、自身免疫性疾病等临床应用研究提供重要手段.1.CD28单克隆抗体的研制及其生物学特性的研究.2.可溶性CD28分子检测试剂方法的初步建立.3.B7家族分子在活化T细胞上的表达及意义.综上所述,该研究①经先后融合72块96孔板,采用有限稀释法进行多次亚克隆化培养及反复筛选,最终获得5株持续、稳定分泌鼠抗人CD28单克隆抗体的杂交瘤细胞株.其中2D5为小鼠IgG2a亚类,其余4株均为IgG1亚类.其中8G8单抗能够联合激发型CD3单抗诱导外周血T细胞的增殖,刺激指数可达7.4;②在对单抗生物学特性和功能进行鉴定的基础上,初步建立了可溶性CD28分子的检测方法;③采用免疫荧光法和流式细胞仪分析活化PBTC表面协同刺激分子4-1BB、OX40、ICOS、CD80、CD86、PD-L1、PD-L2、GL50以及CD4、CD8、CD25的表达,并经RT-PCR证明了B7家族分子在活性T细胞表面的表达为内源性上调所致.5株CD28单抗的成功研制及其试剂盒的初步建立,将为CD28及相关协同刺激分子的基础研究及肿瘤、免疫缺陷病、器官移植和自身免疫病的临床应用研究提供重要手段.

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文摘

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缩写词表

研究背景

第一部分鼠抗人CD28分子功能性单克隆抗体的研制及其生物学特性的鉴定

1主要试剂和材料

2实验方法

3结果

4讨论

参考文献

第二部分人可溶性CD28分子ELISA检测方法的初步建立

第三部分CD28单抗活化的T细胞表面B7家族分子的表达及其意义

小结

研究生学习期间已发表及待发表的论文

本研究所获的基金资助

综述免疫突触与共刺激分子

致谢