胰岛素样生长因子-1基因强化组织工程法诱导裸鼠异位软骨形成的实验研究

摘要

目的：利用条件培养基诱导人骨髓基质干细胞(hMSCs)向软骨细胞分化，运用基因重组技术将人胰岛素样生长因子-1(IGF-1)基因转染修饰诱导后的人骨髓基质干细胞(hMSCs)，测定IGF-1的表达情况，再将转染有IGF-1的hMSCs与再生丝素膜复合培养，植入裸鼠体内以观察诱导异位软骨形成的能力，以基因强化组织工程手段，尝试新型软骨组织工程材料，为临床软骨修复提供新的治疗方法。　　结论：　　1、梯度离心法能够获得hMSCs，体外培养可以增殖且经诱导可定向软骨分化。　　2、可以从人肝组织中扩增出人胰岛素样生长因子-1(hIGF-1)基因；成功构建了人hIGF-1基因的真核表达载体系统pSecTag/FRT/V5-His-hIGF-1。　　3、脂质体介导hIGF-1基因成功转染经诱导的hMSCs，转染的hMSCs能表达具生物学活性的hIGF-1蛋白，转染的hMSCs仍然维持软骨细胞表型。　　4、转染的hMSCs与再生丝素之间具有良好的生物相容性，hMSCs-hIGF-1-再生丝素复合物在裸鼠皮下能诱导异位软骨形成。

目录

文摘

英文文摘

苏州大学学位论文独创性声明及使用授权声明

引 言

文献综述 基因强化软骨组织工程的研究进展

第一部分人骨髓间充质干细胞分离培养及向软骨细胞定向分化的实验研究

1.1材料与方法

1.2结果

1.3讨论

参考文献

第二部分人胰岛素样生长因子-1基因的克隆及其真核表达载体的构建

2.1材料与方法

2.2结果

2.3讨论

参考文献

第三部分脂质体介导IGF-1基因转染人骨髓基质干细胞(hMSCs)及其表达的实验研究

3.1材料与方法

3.2结果

3.3讨论

参考文献

第四部分转染后hMSCs与再生丝素膜复合培养及其在裸鼠体内诱导软骨形成的实验研究

4.1材料与方法

4.2结果

4.3讨论

参考文献

结 论

缩略词表

致 谢