骨髓来源的非粘附基质干细胞在造血重建和遗传缺陷纠正中的作用

摘要

本文假设成体骨髓中存在一类处于非粘附状态的、悬浮的、与造血细胞类似的多潜能骨髓基质干细胞，它们虽具有贴壁潜能，但比贴壁的基质干细胞更原始，称为骨髓来源的非粘附基质干细胞(non-adherentbonemarrow-derivedstromalcell，NA-BM-SC)。这类细胞能够经血液循环转运到全身各器官，在特定的微环境下贴壁，增殖并分化为各器官的终末分化细胞，参与正常组织的再生及损伤组织的修复。　　为了验证这一假设，从以下三个部分进行实验研究：　　第一部分采用反复转移非贴壁骨髓细胞(NA-BMC)体外培养法，取6周龄小鼠股骨和胫骨来源的骨髓总细胞培养10-18天，每天转移一次非贴壁骨髓细胞至新的培养皿，即“pouroff”，至少4次。对一天后贴壁的细胞加入新鲜培养液继续培养。实验结果证实了不仅总BMC可以产生成纤维细胞克隆形成单位，非贴壁骨髓细胞也能产生CFU-F；地塞米松可以抑制CFU-F的形成效率，而1.25(OH)2D3则可以部分拮抗地塞米松的抑制作用。为了确定NA-BMC来源的基质干细胞(NA-BM-SC)是否具有自我更新能力和多分化潜能，采用5-溴脱氧尿核苷(Bromodeoxyuridine，BrdU)掺入法、免疫细胞化学法和流式细胞仪法证实了NA-BM-SC不但具有自我更新能力，而且在体外不同条件下培养，能分化为成骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞和神经胶质细胞。　　第二部分采用维生素D受体(vitaminDreceptor，VDR)基因敲除小鼠，经致死剂量照射后，移植野生型小鼠的NA-BM-SC，通过VDR基因的示踪作用，观察NA-BM-SC是否具有造血重建和参与辐射损伤修复的作用。　　第三部分采用遗传性Ⅰ型佝偻病的动物模型1α羟化酶基因敲除小鼠，经致死剂量照射后，移植野生型小鼠的NA-BM-SC，观察能否纠正其遗传缺陷。

目录

文摘

英文文摘

论文说明：缩略词表

引 言

第一部分：成体骨髓非贴壁基质干细胞培养和鉴

1.1材料与方法

1.2结果

1.3讨论

第二部分：NA-BM-SC在致死剂量辐射小鼠体内的造血重建与多组织分化

2.1材料与方法

2.2结果

2.3讨论

第三部分：NA-BM-SC移植治疗遗传性Ⅰ型佝偻病的实验研究

3.1材料与方法

3.2结果

3.3讨论

结 论

参考文献

综述骨髓基质干细胞的可塑性及其临床应用前景

研究生期间发表的文章

致 谢