几种单克隆抗体纯化方法的比较性研究

摘要

单克隆抗体(mAb)的纯化是其理论研究和临床应用的基础，文献报道的纯化方法较多，包括各种沉淀法、离子交换层析法(IEX)、固定化金属螯合亲和层析法(IMAC)、凝胶层析法(GF)、羟基磷灰石层析法(CHT)、疏水作用层析法(HIC)和亲和层析(AC)法等，但各种方法的适用性及其规律至今尚需进一步研究。本文选择gp130、CD28和CD80三种鼠抗人mAb作为研究对象，采用IEX、IMAC、CHT、GF、AC、(NH4)SO4沉淀、辛酸沉淀等方法对上述三种小鼠腹水来源的mAb的纯化进行了比较性研究，在此基础上进一步从纯化后的抗体纯度、回收率和生物学活性等方面对多种不同纯化方法进行了分析，并优化了实验条件，从而建立了可获得高纯度、生物学活性好和纯化过程易于放大的mAb纯化方法，为其理论研究和临床应用提供了必要的实验基础。具体如下： 1.离子交换一步法快速纯化gp130激发型单克隆抗体B-S12的研究； 2.三步串联层析法获得高纯度CD28激发型单克隆抗体2F5的研究； 3.二步串联层析法纯化CD80阻断型单克隆抗体4E5。

目录

文摘

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研究背景

第一部分离子交换一步法纯化gp130激发型单克隆抗体B-S12

材料和方法

结果

讨论

参考文献

第二部分三步串联层析法纯化CD28激发型单克隆抗体2F5

材料和方法

结果

讨论

参考文献

第三部分两步串联层析法纯化CD80阻断型单克隆抗体4E5

材料和方法

结果

讨论

参考文献

小结

缩写词表

研究生学习期间已发表及待发表的论文

本课题所获的基金资助

致谢