激发型CD40单抗联合CTL对人源化SCID小鼠B细胞淋巴瘤免疫治疗的实验研究

摘要

本课题的研究目的是建立人源化SCID小鼠人B细胞淋巴瘤模型，在此基础上探讨激发型抗人CD40单克隆抗体5c11联合CTL对B细胞淋巴瘤的免疫治疗作用。 SCID小鼠腹腔注射环磷酰胺(CTX)抑制骨髓造血，连续4天后，通过腹腔注射移植人外周血单个核细胞(PBMC)。移植4周、8周、12周后分别收集外周血、脾脏、肝脏。荧光显微镜下观察SCID小鼠外周血中人CD3+、CD19+细胞；流式细胞仪测定小鼠全血中人CD3+、CD19+细胞百分率；免疫组织化学分析SCID小鼠肝脏和脾脏中人CD3+、CD19+细胞；ELISA检测SCID小鼠血清中人免疫球蛋白IgG含量。结果显示：(1)SCID小鼠移植人外周血单个核细胞4周、8周、12周后在小鼠外周血中通过荧光显微镜下可观察到人CD3+、CD19+细胞，4周后流式细胞仪测得小鼠外周血单个核细胞中人CD19+、CD3+细胞百分率分别为10.6％、31.7％；(2)免疫组织化学结果显示在小鼠脾脏中存在人CD3+、CD19+细胞；(3)移植人外周血单个核细胞4周、8周、12周后ELISA测得小鼠血清中人免疫球蛋白IgG的含量分别为390μg/ml、1100μg/ml、1040μg/ml。 对低肿瘤负荷小鼠治疗结果显示，经5c11、CTL或5c11联合CTL治疗后各组小鼠肿瘤形成时间明显晚于对照组，生存期显著延长，CTL与联合治疗分别取得了33％和67％的完全缓解率。对高肿瘤负荷小鼠治疗结果显示，虽然未能使得已形成的实体瘤消退，也未取得完全缓解率，但是各治疗组荷瘤小鼠肿瘤生长速度均显著减缓，荷瘤小鼠生存期明显延长。免疫组织化学结果显示，CTL治疗组、5c11联合CTL治疗组小鼠肿瘤组织内均有人CD25+细胞浸润，且联合治疗组浸润的细胞数量高于CTL单独治疗组。

目录

文摘

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缩略词表

研究背景

一肿瘤免疫学治疗概述

二树突状细胞与肿瘤免疫学治疗

三人源化SCID小鼠模型在免疫学中的应用

四 CD40分子及其物理学功能

参考文献

第一部分人源化SCID小鼠模型的建立及其鉴定

材料与方法

结果

讨论

参考文献

第二部分 激发型CD40单抗联合CTL对B细胞淋巴瘤的免疫治疗作用

材料与方法

结果

讨论

参考文献

小结与展望

本课题所获的基金资助

硕士研究生期间发表和即将发表的论文

CD40信号在树突状细胞中的传导通路

致谢