体外培养人胚胎生殖干细胞的超微结构及培养体系中细胞因子的表达

摘要

目的：检测细胞培养上清液中LIF、SCF和bFGF的水平，探索更完善的人胚胎生殖干细胞(EG细胞)体外培养体系；光镜观察人PGCs，透射电镜观察人EG细胞的超微结构，深入了解人PGCs和人EG细胞的形态学特征。方法：采用组织块培养法体外培养人EG细胞，收集不同生长阶段(第3d和第9d)的细胞培养上清液，用双抗体夹心ABC-ELISA法定量测定其中人LIF、SCF、bFGF的水平；取胚胎两侧生殖腺嵴、中肾嵴常规HE染色，制备切片，在光镜下观察并拍摄照片；收集足量的人EG细胞和胚胎成纤维细胞制备超薄切片，在透射电镜下观察并拍摄照片。结论：本实验获得的人EG细胞来源于人PGCs，其超微结构符合未分化细胞的结构特点；利用源于胚胎自身的成纤维细胞形成饲养层，能分泌足够的细胞因子以维持人EG细胞体外增殖并抑制其分化。

目录

文摘

英文文摘

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引 言

第一部分人胚胎生殖干细胞培养体系中LIF、SCF和bFGF的表达

第二部分人原始生殖细胞的光镜结构

第三部分人胚胎生殖干细胞的超微结构

结 论

参考文献

综述 白血病抑制因子（LIF）的研究进展

附录(缩略词表)

攻读学位期间发表的论著、论文

致 谢