低功率激光促进大鼠急性骨骼肌钝挫伤再生与修复的机制研究

摘要

目的：本研究采用美国通过FDA认可的Erchonia EML（ML2）型GaAlAs低功率激光器，对急性骨骼肌钝挫伤模型动物进行治疗，从组织学、生物化学、分子生物学等不同研究角度和层次，探讨低功率激光对骨骼肌损伤的治疗作用及其机制，探索低功率激光在运动医学临床实践中的应用方法。 方法：动物分组与处理：将96只健康雄性SD大鼠（180～220g）随机分为正常对照组（6只）和实验组（90只），实验组又分为自然愈合组（48只）和激光治疗组（42只）。自然愈合组又根据取材时间点的不同，分为：损伤后即刻组、损伤后第1天（24h）组、损伤后第2天（48h）组、损伤后第3天（72h）组、损伤后第7天组、损伤后第14天组、损伤后第21天组、损伤后第28天组；激光治疗组又根据取材时间点的不同，分为：损伤后第1天（24h）组、损伤后第2天（48h）组、损伤后第3天（72h）组、损伤后第7天组、损伤后第14天组、损伤后第21天组、损伤后第28天组。激光治疗组在钝挫伤局部进行激光照射，采用美国Erchonia EML（ML2）型低功率GaALAs激光器，波长635 nm，功率7mW，照射面积0．4c㎡，功率密度17．5mW／c㎡，照射时间20min，每日1次，疗程为10天。自然愈合组不进行治疗。分别在损伤后即刻、损伤后第1、2、3、7、14、21、28天处死动物，留取血浆，Eppendoff管密封保存于—80℃冰箱待测；速取损伤区域腓肠肌，用冰生理盐水洗去残留血液，再从每块组织中切取1mm3组织，用2．5%戊二醛固定，用于电镜观察（仅损伤后即刻组、第3，7，14，21、28天组进行此项实验），每组从6只动物中随机取3只动物）；剩余部分肌肉的二分之一置于冻存管中在液氮中速冻3～4小时，然后转移至—80℃冰箱待测，另二分之一肌肉用10%福尔马林固定，用于HE染色光镜观察和免疫组织化学实验。 结果：①HE染色光镜和透射电镜观察、血浆CK活性变化、腓肠肌MHC—ⅡbmRNA水平变化等研究结果提示，低功率GaAlAs激光能促进大鼠急性腓肠肌钝挫伤后肌肉再生，加速组织愈合的进程，减少疤痕形成，提高愈含质量。②低功率GaAlAs激光能提高受损肌肉的SOD活性，增强抗氧化能力，减轻氧化损伤。③低功率GaAlAs激光能促进急性骨骼肌钝挫伤大鼠损伤局部肌组织IGF—ⅠmRNA的表达。④低功率GaAlAs激光能促进骨骼肌钝挫伤大鼠损伤局部肌组织MHC—Ⅱb mRNA的表达。⑤低功率GaAlAs激光能抑制骨骼肌钝挫伤大鼠损伤局部组织Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA的表达。⑥低功率GaAlAs激光能促进大鼠急性骨骼肌钝挫伤后肌卫星细胞的增殖。 结论：⑴低功率GaAlAs激光对大鼠急性骨骼肌钝挫伤有治疗作用。⑵低功率GaAlAs激光照射能提高受损肌肉的抗氧化能力，减轻氧化损伤。⑶低功率GaAlAs激光能促进损伤骨髂肌卫星细胞的增殖和IGF—Ⅰ mRNA的表达，从而促进肌肉再生。⑷低功率GaAlAs激光能抑制损伤骨骼肌局部组织Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA的表达，减少疤痕形成。

目录

文摘

英文文摘

论文说明：缩略词表

声明

1.序 言

1.1文献综述

1.1.1骨骼肌损伤

1.1.2低功率激光

1.2研究目的和意义

2.实验材料和方法

2.1动物分组及处理

2.2样品的采集与处理

2.3检测指标与测试方法

2.4实验所用主要仪器、设备

2.5统计分析

3.实验结果

3.1大鼠腓肠肌HE染色光镜观察结果

3.2低功率激光照射对急性骨骼肌顿挫伤大鼠腓肠肌超微结构的影响

3.3低功率激光照射对急性骨骼肌顿挫伤大鼠血浆CK活性的影响

3.4低功率激光照射对急性骨骼肌顿挫伤大鼠血浆SOD活性、MDA含量的影响

3.5低功率激光照射对急性骨骼肌顿挫伤大鼠腓肠肌SOD活性、MDA含量的影响

3.6低功率激光照射对急性骨骼肌顿挫伤大鼠腓肠肌IGF－I mRNA表达的影响

3.7低功率激光照射对急性骨骼肌顿挫伤大鼠腓肠肌MHC－IIb mRNA表达的影响

3.8低功率激光照射对急性骨骼肌顿挫伤大鼠腓肠肌Collagen-I mRNA表达的影响

3.9低功率激光照射对急性骨骼肌顿挫伤大鼠腓肠肌Collagen-Ⅲ mRNA表达的影响

3.10低功率激光照射对急性骨骼肌顿挫伤大鼠腓肠肌卫星细胞增殖活性的影响

4.分析与讨论

4.1低功率激光照射对急性骨骼肌顿挫伤大鼠组织学愈合进程的影响

4.2低功率激光照射对急性骨骼肌顿挫伤大鼠血浆肌酸激酶(CK)活性的影响

4.3低功率激光照射对急性骨骼肌顿挫伤大鼠自由基代谢的影响

4.4低功率激光照射对急性骨骼肌顿挫伤大鼠腓肠肌IGF-I mRNA表达的影响

4.5低功率激光照射对急性骨骼肌顿挫伤火鼠腓肠肌MHC-IIb mRNA表达的影响

4.6低功率激光照射对急性骨骼肌顿挫伤大鼠腓肠肌Ⅰ型、Ⅲ型胶原mRNA表达的影响

4.7低功率激光照射对急性骨骼肌顿挫伤大鼠腓肠肌卫星细胞增殖活性的影响

4.8激光的类型、波长、剂量参数、治疗方案与治疗效果密切相关

5.全文总结

6参考文献

7攻读学位期间公开发表的论文

9致谢