应用比较基因组杂交和多色荧光原位杂交分析肺癌染色体异常

摘要

目的：应用比较基因组杂交技术(CGH)和多色荧光原位杂交技术(M-FISH)分析肺癌的染色体异常，了解染色体异常与肺癌不同病理类型和临床特征之间的关系。 方法：试验分为两个部分，第一部分采用CGH技术对30例肺癌组织的DNA进行检测，以了解肺癌全基因组的变化；第二部分采用R显带核型分析、CGH和M-FISH对1例原发性小细胞肺癌标本和2例肺癌细胞株染色体异常进行同步分析，了解染色体扩增或缺失与不平衡易位改变的关系。 结果： 1.30例肺癌标本中CGH都发现有染色体异常改变，每例标本最少涉及2条染色体异常，不同病理类型肺癌染色体畸变数无明显的差异。染色体基因扩增的发生率比缺失高，比例约为2:1。 2．不同病理类型肺癌在1p11-p22、5p11-p14、16p11-P12、19q13、19p13、20p12和21q21等区域均有高频的扩增，在5q、6p24-pter、9p31-qter、13q21-qter和14q21-qter等区域均有高频的缺失。 3．不同病理类型肺癌的染色体异常表现也有一定的区别：(1)小细胞癌在6p12-p21和4p13-p15区域有高频的扩增达70％和50％，显著高于鳞癌和腺癌(P<0.05，=0.05)；在11p11-p14和18q12区域扩增频数分别为70％和60％，都显著高于腺癌(P<0.05，-<0.05)：在18p11区域扩增频数为50％，显著高于鳞癌(P=0.05)；在8q22-qter和4q的缺失频数均为50％，显著高于鳞癌(P<0.05，=0.05)。(2)鳞癌在2p12-p16区域的扩增频数为40％，显著高于腺癌(P<0.05)；在3q24-qter区域鳞癌的扩增频数为40％，显著高于小细胞癌(P<0.05)。(3)腺癌在2p和8q22-qter的缺失频数均为50％，显著高于鳞癌(P<0.05，<0.05)。 4．R显带在细胞株A-549和H-1299中分别发现4条和2条染色体异常，主要为染色体的大片段缺失、延伸或插入。原发性小细胞肺癌中染色体十分的短小，R显带难以进行分析。CGH在细胞株A-549、H-1299和原发性小细胞肺癌中分别发现有7条、6条和16条染色体畸变，主要为染色体扩增或缺失。M-FISH在细胞株A-549、H-1299和原发性小细胞肺癌中分别发现有7个、8个和13个染色体异常，主要为染色体不平衡易位。 5．原发性小细胞肺癌细胞5、7、8、9、18、16、1和19发生染色体不平衡易位的几率较高，常见的易位有t(9;14)、t(16；19)、t(16；17)、t(2；5；18)和t(7；12；19)。 6．在细胞株A-549、H-1299和原发小细胞肺癌细胞中R显带和CGH发现的一些有延伸、扩增或缺失的染色体，M-FISH在相应的染色体上发现不平衡易位。 结论： 1．遗传物质的异常改变在肺癌细胞中普遍存在，肺癌细胞染色体扩增比缺失更为常见，遗传物质异常是肺癌发生和发展的基础。 2．不同病理类型肺癌(腺癌、鳞癌和小细胞肺癌)有共同的染色体异常区域，但在一些染色体区域的异常有所不同，这可能导致三者不同的生物学特性，也可能为三者的鉴别诊断提供一种遗传学标志。 3．随着恶性肿瘤病程的进展，染色体畸变的复杂性也明显的提高。 4．不同的致癌因素(如吸烟)可导致不同的染色体异常。 5．核型分析、CGH和M-FISH有各自的优点与不足，联合检测能更深入和全面地了解肺癌的染色体异常。 6．原发肺癌组织的染色体异常比细胞株更为复杂和多变，对原发肺癌组织的染色体分析更能揭示染色体异常在肺癌发生和发展中的作用。

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论文说明：缩写词表

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引言

第一部分比较基因组杂交技术(CGH)在肺癌研究中的应用

第二部分应用多色荧光原位杂交技术(M-FISH)分析肺癌的染色体异常

研究结果

结论

综述：肺癌中染色体异常的研究进展

学术活动总结

致谢