伊马替尼/雷帕霉素对CML患者CD33细胞内mTOR/S6信号转导途径和T细胞免疫功能的影响

摘要

研究目的： 1．研究初发慢性髓细胞白血病(CML)、伊马替尼治疗后CML、伊马替尼耐药CML患者CD33+细胞内mTOR/S6信号转导途径及RAPA对其影响。 2．研究伊马替尼及雷帕霉素(RAPA)对CML患者T细胞免疫功能的影响。 方法： 1．以缺铁性贫血患者为正常对照组，用流式细胞仪检测初发CML组患者骨髓CD33+细胞胞内p-mTOR、p-S6蛋白含量及CD3+、CD3+CD8-、CD3+CD8+T淋巴细胞内IFN-γ表达；体外加用RAPA后细胞内p-mTOR、p-S6和INF-γ的变化。 2．流式细胞仪检测伊马替尼治疗、羟基脲+干扰素(HU+IFN)治疗CML慢性期患者，骨髓CD33+细胞内p-mTOR、p-S6蛋白含量及CD3+、CD3+CD8-、CD3+CD8+T淋巴细胞内IFN-γ表达；体外加用RAPA后细胞内p-mTOR、p-S6和INF-γ的变化。 3. 流式细胞仪检测伊马替尼耐药CML患者骨髓CD33+细胞内p-mTOR、p-S6蛋白含量及CD3+、CD3+CD8-、CD3+CD8+T淋巴细胞内IFNγ表达；体外加用RAPA后细胞内p-mOR、p-S6和INF-γ的变化。 结果： 1．初发CML组CD33+细胞内p-mTOR、p-S6含量高于正常对照组[(9.53±7.87)％vs(2.43±2.54)％；P<0.05][(7.64±3.17)％vs (1.21±1.44)％；P<0.05]，加用RAPA后能显著降低p-roTOR、p-S6含量[(9.53±7.87)％vs(3.64±3.29)％；P<0.05][(7.64±3.17)％vs (1.85±2.51)％；P<0.05]。 2．初发CML组CD3+、CD3+CD8-、CD3+CD8+T淋巴细胞内INF-γ的表达水平与正常对照组同类细胞内INF-γ表达没有显著性差异，[(11.08±12.05)％vs(13.31±8.33)％；P>0.05]、[(8.66±6.34)％vs（10.39±5.59)％；P>0.05]、[(15.29±10.01)％vs (17.77±11.61)％;p>0.05]；RAPA能够降低初发CML组淋巴细胞内IFN-γ的表达，[11.08±12.05)％vs (5.77±5.91)％;P<0.05]、[(8.66±6.34)％vs(4.83±5.18)％；P<0.05、[(15.29+10.01)％vs (9.74±8.85)％，P<0.05]。 3．伊马替尼治疗组骨髓CD33+细胞内p-mTOR含量与初发CML组没有显著性差异[(10.61±13.7)％vs(9.53±7.87)％；P>0.05]；较HU+IFN治疗组显著增高，[(10.61±13.70)％vs (3.67±4.59)％；P<0.05]；RAPA能降低伊马替尼治疗组CD33+细胞内P-mTOR含量，[(10.61±13.70)％vs (3.86±8.99)％；P<0.05]。以初发CML组CD33+细胞内P-mTOR 95％可信限为界，伊马替尼治疗组有25.7％的CD33+细胞内p-mTOR增高，RAPA能降低其含量，[(29.89±14.89)％vs(8.26±15.45)％，P<0.05]。HU+IFN组CD33+细胞内p-mTOR含量较初发CML组显著降低，[(3.67±4.59)％vs (9.53±7.87)％;P<0.05。 4．伊马替尼治疗组CD33+细胞内P-S6含量较初发CML组CD33+细胞内p-S6没有显著性差异，[19.65±30.19)％vs (7.64±3.17)％；P>0.05]。HU+IFN组CD33+细胞内p-S6含量较初发CML组CD33+细胞内p+S6显著降低，[(2.95±2.70)％vs(7.64±3.17)％；P<0.05]。以初发CML组CD33+细胞内P-S6 95％可信限为界，伊马替尼治疗组有25.7％CD33+细胞内p-S6含量增高，RAPA能降低此p-S6含量，[(44.48±19.43)％vs (10.53±12.39)％;P<0.05]。 5．伊马替尼治疗组CD3+、CD3+CD8-、CD3+CD8+T淋巴细胞内INF-γ的表达显著高于初发CML组：[(17.28±12.71)％ vs (11.08±12.05)％，P<0.05]、[(13.06±9.34)％、vs (8.66±6.34)％；P<0.05]、[(22.50±16.70)％vs (15.29±10.01)％；P<0.05]，RAPA不能降低T细胞内INF-γ的表达，[(17.28±12.71)％vs 13.41±11.29)％;P>0.05]、[(13.06±9.34)％vs (10.06±8.21)％；P>0.05]、[(22.50±16.70)％vs(20.54±13.22)％，P>0.05]。伊马替尼治疗组CD3+、CD3+CD8-、CD3+CD8+T淋巴细胞内INF-γ的表达显著高于HU+IFN治疗组，[(17.28±12.71)％vs(10.05±8.23)％; P<0.05]、[(13.06±9.34)％(6.56±5.53)％; P<0.05]、[(22.50±16.70)％vs (12.53±10.43)％; P<0.05]。HU+IFN 疗组CD3+、CD3+CD8-、CD3+CD8+T淋巴细胞内INF-γ,的表达与初发CML组没有显著性差异，[(10.05±8.23)％vs (11.08±12.05)％；P>0.05]、[(6.56±5.53)％vs (8.66±6.34)％；P>0.05]、[(12.53±10.43)％vs (15.29±10.01)％；P>0.05]。 6．伊马替尼治疗后p-mTOR/p-S6增高组中，RAPA不影响该组CD3+、CD3+CD8-、CD3+CD8+T淋巴细胞内INF-γ表达，[(24-69±10.86)％vs (24.32±12.08)％；P>0.05]、[(18.79±8.72)％vs (17.0±6.53)％; P>0.05]、[(31.59±12.86)％vs(30.45±14.99)％；P>0.05]。 7．伊马替尼耐药组中有2例(20％)患者CD33+细胞内p-mTOR及p-S6含量增高，RAPA能降低其含量；RAPA不影响该2例患者CD3+、CD3+CD8-、CD3+CD8+T淋巴细胞内INF-γ的表达。 8．1例难治性CML急粒变经伊马替尼和RAPA联合治疗成功。 结论： 1．初发CML患者CD33+细胞内存在mTOR/S6信号转导途径活化，RAPA能够抑制该活化。 2.少部分伊马替尼治疗后CML患者CD33+细胞内mTOR/S6信号转导途径会出现代偿性活化，RAPA能抑制该活化。 3．少数伊马替尼耐药患者可能与mTOR/S6信号转导途径代偿性活化有关，RAPA能抑制该活化。 4．伊马替尼治疗CML可能不影响细胞免疫功能；加用RAPA后亦可能不影响患者细胞免疫功能。 5．RAPA联合伊马替尼可能是CML患者特别是伊马替尼耐药CML患者的一个新选择。

目录

文摘

英文文摘

论文说明：中英文缩略词表

声明

序言

第一部分RAPA对初发CML CD33+细胞内mTOR/S6信号转导途径和T细胞免疫功能的影响

前言

病例与方法

结果

讨论

参考文献

第二部分RAPA对伊马替尼治疗后CML慢性期患者CD33+细胞内mTOR/S6信号转导途径和T细胞免疫功能的影响

前言

病例与方法

结果

讨论

参考文献

第三部分RAPA对伊马替尼耐药CML患者CD33+细胞内mTOR/S6信号转导途径和T细胞免疫功能的影响

前言

病例与方法

结果

讨论

参考文献

结论

攻读学位期间公开发表的论文

致谢