干扰TIGAR基因增强表阿霉素对HepG2细胞凋亡诱导作用的实验研究

摘要

目的:探讨干扰TIGAR基因是否能增强表阿霉素对HepG2细胞的凋亡诱导作用
　　 方法:化学合成荧光标记的TIGAR-siRNA,通过WESTERN-BLOT检测其干扰效能；噻唑蓝(MTT)实验计算表阿霉素(EPI)对HepG2细胞的半数抑制浓度(IC50),通过Western blot测定细胞经RNA干扰和/或表阿霉素处理后的TIGAR蛋白表达情况,利用Hoechst染色,流式细胞术检测细胞经处理后的凋亡情况。
　　 结果:细胞经RNA干扰后的Western blot显示TIGAR-siRNA可高效干扰TIGAR蛋白表达,干扰后约72小时干扰效果最佳。MTT结果分析显示表阿霉素对HepG2细胞IC50为1.916μg/ml。Western blot结果显示表阿霉素可增加TIGAR蛋白表达,但可被TIGAR-RNAi高效干扰。Hoechst染色及流式细胞术凋亡分析结果揭示,随EPI浓度增加,细胞凋亡增加；TIGAR-RNAi本身并不能引起明显的细胞凋亡,但可增加EPI的凋亡诱导作用,在各浓度组,TIGAR-RNAi均可增加表阿霉素对HepG2细胞的凋亡诱导作用。
　　 结论:干扰TIGAR基因可增强表阿霉素对HepG2细胞的凋亡诱导作用