基质金属蛋白酶9在蛛网膜下腔出血后脑血管痉挛中作用机制的初步研究

摘要

第一部分、大鼠蛛网膜下腔出血后基质金属蛋白酶9在基底动脉壁的表达变化
　　 目的：探讨大鼠蛛网膜下腔出血(Subarachnoid Hemorrhage，SAH)后金属基质蛋白酶9(Matiix Metallaproteinases-9，MMP-9)在基底动脉壁中的表达变化，及其与脑血管痉挛(Cerebral Vasospasm，CVS)的关系。
　　 方法：66只健康成年SD大鼠随机分为正常组，对照组(即NS组，枕大池注入等量生理盐水)和SAH组，NS组和SAH组又分为1d，3d，5d，7d，14d五个亚组(n=6)。应用枕大池一次注血法制成SAH动物模型；通过HE染色光镜下观察基底动脉的病理学变化，测定血管壁厚度及血管腔内径，以此评价脑血管痉挛；并应用免疫组化法评估大鼠基底动脉管壁MMP-9在不同时间点的表达。
　　 结果：HE染色显示SAH组基底动脉管腔狭窄，内膜皱褶，平滑肌细胞肥大，3d时病理学变化最显著，管腔狭窄明显，为对照组的66％；管壁明显增厚，约为对照组的1.7倍，之后狭窄程度渐减轻，14 d时接近正常。SAH后基底动脉壁MMP-9表达增加，表达高峰为注血后3-5d，随后开始下降，14 d恢复正常。
　　 结论：1.通过构建大鼠枕大池一次注血模型，能够观察到基底动脉发生明显的细胞形态改变、管壁的增厚以及管腔的狭窄，提示SAH后存在明确的CVS。2.SAH后MMP-9在基底动脉壁的表达上调，并与CVS的时相一致，提示MMP-9可能参与了CVS的病理过程。
　　 第二部分、MMP-9抑制剂对大鼠蛛网膜下腔出血后脑血管痉挛干预作用的实验研究
　　 目的：探讨MMP-9抑制剂对大鼠蛛网膜下腔出血后脑血管痉挛的干预作用
　　 方法：24只健康成年SD大鼠随机分成对照组，SAH组，安慰剂组，MMP-9抑制剂治疗组4个组。应用枕大池一次注血法制成SAH动物模型，治疗组在注血前经枕大池注入MMP-9抑制剂SB-3CT0.3mg/0.2ml，而安慰剂组注血前仅注射等量生理盐水(NS)。3天后利用常规HE染色的方法观察大鼠基底动脉管壁形态，利用免疫组化的方法观察MMP-9在基底动脉壁的表达。
　　 结果：HE染色显示SAH组与安慰剂组的基底动脉内膜出现皱褶，管腔明显狭窄，为正常对照组的70％；管壁明显增厚，约为正常对照组的2倍；治疗组基底动脉管径扩大、管壁增厚程度减轻以及CVS值下降，与SAH组和安慰剂组相比差异显著(P<0.01)。免疫组化结果显示MMP-9在SAH组及安慰剂组中膜及内膜下有较强的免疫染色，外膜也可见到散在的染色信号。治疗组MMP-9免疫组化染色不明显。
　　 结论：MMP-9抑制剂SB-3CT对SAH后CVS有一定的防治作用，可使痉挛血管壁增厚程度及管腔狭窄程度减轻。