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免疫负调控基因在造血干细胞移植后移植物抗宿主病中的调控作用

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序 言

参考文献

病例与方法

1. 病例信息

2.移植预处理方案及GVHD预防、诊断和治疗

3.供体造血干细胞动员及采集

5. 巨细胞病毒(CMV)感染及肝静脉闭塞病(VOD)的预防:

6. 主要试剂和仪器设备

7.标本采集

8.实时定量PCR检测

结 果

1.移植后造血重建情况

2. aGVHD的发生情况

3.其他并发症

讨 论

结 论

参考文献

综 述

参考文献

中英文缩略词汇表

致谢

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摘要

目的:初步研究免疫负调控基因β-arrestin、Tim-3及SOCS-3在异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)后早期(即移植后100天内)的表达情况;探讨其在急性移植物抗宿主病(aGVHD)中的调控作用。
  方法:选择2011年03月至2012年01月在苏州大学附属第一医院行异基因造血干细胞移植的97例患者作为研究对象:1)观察并收集其移植类型、aGVHD的发生情况、其它并发症、复发及生存情况。2)采集移植患者各时间点(移植后30天、45天、60天、90天,发生aGVHD时)的EDTA抗凝外周血标本6ml,同时留取正常人的标本作为基础表达水平,Ficoll法分离出其中单个核细胞(PBMC),抽提总RNA并逆转为cDNA,采用实时定量PCR的方法,检测上述各免疫负调控基因mRNA的相对表达水平,研究移植后100天内各负调控基因在发生aGVHD的患者与未发生aGVHD的患者中的表达变化趋势;研究aGVHD发生时各负调控基因表达量的变化,以及不同移植类型移植患者中的表达情况。
  结果:1)无aGVHD组和aGVHD组比较,无aGVHD组β-arrestin基因表达在移植后30天较aGVHD组明显偏低(P﹤0.001),且低于正常水平(P﹤0.001);在45天及之后时间点各组患者β-arrestin恢复至正常水平;aGVHD组Tim-3基因表达水平在移植后90天内均低于正常水平(P﹤0.05),而无aGVHD组Tim-3表达水平一直保持在正常水平附近(P>0.05);SOCS-3在无aGVHD组移植后45天时表达升高(P<0.05),60天时恢复至移植前水平,aGVHD组病人中SOCS-3在45天时升高更显著(P<0.01),且在90天时仍未恢复至正常水平(P<0.05)。2)比较各基因在aGVHD发生时与同移植类型、同时间点未发生aGVHD者的表达水平。β-arrestin、SOCS-3的表达水平较同时间点无aGVHD患者显著升高(P<0.01),在aGVHD好转后均呈下降趋势;Tim-3的表达则在aGVHD时明显降低(P<0.05),且在整个aGVHD过程中无升高趋势。3)不同移植类型组间在移植后各时间点Tim-3和SOCS3表达水平有差异(组间P值﹤0.05)。其中,同胞移植组Tim-3表达水平在移植后各时间点均较脐血移植组明显偏高;在移植后45天、60天和90天较单倍体移植组也明显偏高。而同胞移植组的SOCS3表达水平在移植后45天和60天较其他各移植组均明显偏低(P值﹤0.05,图10),不同移植组间β-arrestin的表达水平无明显差异(P>0.05)
  结论:β-arrestin在移植后30天的表达水平与aGVHD的发生有显著相关性,Tim-3在移植后aGVHD患者各时间点的表达水平均显著降低,SOCS3在移植后45天、60天和90天的表达水平升高与aGVHD的发生有显著相关性。同胞全相合组与脐血移植组和单倍体移植组间Tim-3的表达水平存在差异,同胞全相合移植与其他移植类型间SOCS3的表达水平存在差异,β-arrestin在不同移植类型间无显著表达差异。

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