免疫负调控基因在造血干细胞移植后移植物抗宿主病中的调控作用

摘要

目的：初步研究免疫负调控基因β-arrestin、Tim-3及SOCS-3在异基因造血干细胞移植（allo-HSCT）后早期（即移植后100天内）的表达情况；探讨其在急性移植物抗宿主病（aGVHD）中的调控作用。
　　方法：选择2011年03月至2012年01月在苏州大学附属第一医院行异基因造血干细胞移植的97例患者作为研究对象：1）观察并收集其移植类型、aGVHD的发生情况、其它并发症、复发及生存情况。2）采集移植患者各时间点（移植后30天、45天、60天、90天，发生aGVHD时）的EDTA抗凝外周血标本6ml，同时留取正常人的标本作为基础表达水平，Ficoll法分离出其中单个核细胞（PBMC），抽提总RNA并逆转为cDNA，采用实时定量PCR的方法，检测上述各免疫负调控基因mRNA的相对表达水平，研究移植后100天内各负调控基因在发生aGVHD的患者与未发生aGVHD的患者中的表达变化趋势；研究aGVHD发生时各负调控基因表达量的变化，以及不同移植类型移植患者中的表达情况。
　　结果：1）无aGVHD组和aGVHD组比较，无aGVHD组β-arrestin基因表达在移植后30天较aGVHD组明显偏低（P﹤0.001），且低于正常水平（P﹤0.001）；在45天及之后时间点各组患者β-arrestin恢复至正常水平；aGVHD组Tim-3基因表达水平在移植后90天内均低于正常水平(P﹤0.05),而无aGVHD组Tim-3表达水平一直保持在正常水平附近（P＞0.05）；SOCS-3在无aGVHD组移植后45天时表达升高（P＜0.05），60天时恢复至移植前水平,aGVHD组病人中SOCS-3在45天时升高更显著（P＜0.01），且在90天时仍未恢复至正常水平（P＜0.05）。2）比较各基因在aGVHD发生时与同移植类型、同时间点未发生aGVHD者的表达水平。β-arrestin、SOCS-3的表达水平较同时间点无aGVHD患者显著升高（P＜0.01），在aGVHD好转后均呈下降趋势；Tim-3的表达则在aGVHD时明显降低（P＜0.05），且在整个aGVHD过程中无升高趋势。3)不同移植类型组间在移植后各时间点Tim-3和SOCS3表达水平有差异（组间P值﹤0.05）。其中，同胞移植组Tim-3表达水平在移植后各时间点均较脐血移植组明显偏高；在移植后45天、60天和90天较单倍体移植组也明显偏高。而同胞移植组的SOCS3表达水平在移植后45天和60天较其他各移植组均明显偏低（P值﹤0.05，图10）,不同移植组间β-arrestin的表达水平无明显差异（P＞0.05）
　　结论：β-arrestin在移植后30天的表达水平与aGVHD的发生有显著相关性，Tim-3在移植后aGVHD患者各时间点的表达水平均显著降低，SOCS3在移植后45天、60天和90天的表达水平升高与aGVHD的发生有显著相关性。同胞全相合组与脐血移植组和单倍体移植组间Tim-3的表达水平存在差异，同胞全相合移植与其他移植类型间SOCS3的表达水平存在差异，β-arrestin在不同移植类型间无显著表达差异。

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序 言

参考文献

病例与方法

1. 病例信息

2．移植预处理方案及GVHD预防、诊断和治疗

3.供体造血干细胞动员及采集

5. 巨细胞病毒（CMV）感染及肝静脉闭塞病（VOD）的预防：

6. 主要试剂和仪器设备

7.标本采集

8.实时定量PCR检测

结 果

1．移植后造血重建情况

2. aGVHD的发生情况

3.其他并发症

讨 论

结 论

参考文献

综 述

参考文献

中英文缩略词汇表

致谢