iPDMS微阵列技术应用于非小细胞肺癌诊疗的研究

摘要

目的:探讨新型固体支撑材料改性聚二甲基硅氧烷（Integrated Poly(dimethysiloxane)，iPDMS）多肽微阵列和蛋白微阵列技术应用于非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer，NSCLC）诊疗的研究。
　　方法:第一部分对p53和EGFR胞外段的序列进行叠瓦式切割，构建高内涵精细多肽库，建立iPDMS多肽微阵列检测方案；对150例NSCLC患者和96例健康对照者进行血清p53和EGFR多肽自身抗体的大规模筛选；应用传统生物信息学手段进行分析研究，确定血清p53和EGFR自身抗体所识别的线性抗原表位位点，探讨其潜在的研究价值。
　　第二部分采用iPDMS蛋白微阵列法定量检测50例NSCLC患者、50例健康对照者血清IL-6、IL-8、MCP-1、GM-CSF的水平，结合NSCLC患者不同临床病理参数进行分析。
　　结果:
　　第一部分 p53和EGFR多肽的自身抗体既存在于NSCLC患者血清中，也存在于健康对照组的血清中，微阵列芯片表达差异显著分析（Significance analysis of microarrays，SAM）显示在NSCLC组和健康对照组血清中存在针对4条p53多肽和2条EGFR多肽的差异表达的自身抗体，这6条多肽的自身抗体在NSCLC患者血清的响应明显高于健康对照组（P<0.05），对这6条具有潜在诊断价值的多肽进行受试者工作特征曲线（Receiver operator characteristic curve，ROC）分析发现多指标联合的诊断模型具有更高的诊断效率，由此得到了一个由 p53-02，p53-04，p53-05和EGFR-48构成的多指标联合诊断模型，该组合模型在特异度为90％时能达到36.7%的灵敏度。线性抗原位点分析发现，血清p53自身抗体的主要识别氨基端（N端）和羧基端（C端）的线性表位，而非中央热点突变区，而血清EGFR自身抗体识别的高频位点集中分布在EGFR胞外段L2和S2结构域。
　　第二部分与健康对照组相比，NSCLC患者血清IL-6、IL-8、GM-CSF水平显著升高（P<0.01），MCP-1水平升高（P<0.05），差异有统计学意义；与I+II期患者相比，III+IV期患者血清IL-6水平显著升高（P<0.01），血清MCP-1水平降低（P<0.05），血清GM-CSF水平显著降低（P<0.01），差异有统计学意义，血清IL-8水平的差异无统计学意义（P>0.05）；与无淋巴结转移的患者相比，有淋巴结转移的患者血清 IL-6水平升高（P<0.05），差异有统计学意义，血清 IL-8、MCP-1、GM-CSF水平的差异无统计学意义（P>0.05）；与肺鳞癌患者相比，肺腺癌患者血清IL-8水平升高（P<0.05），差异有统计学意义，血清IL-6、MCP-1、GM-CSF水平的差异无统计学意义（P>0.05）。
　　结论:
　　1. NSCLC组和健康对照组之间存在差异性表达的p53和EGFR多肽自身抗体，可通过iPDMS多肽微阵列技术加以检测。基于p53和EGFR多肽库的NSCLC诊断模型展示出了一定的临床应用前景。iPDMS多肽微阵列技术为p53和EGFR线性表位的精细定位研究提供了强有力的工具。
　　2.血清IL-6、IL-8、MCP-1、GM-CSF水平的改变与NSCLC的发生、发展密切相关，其血清学定量检测不仅有助于了解 NSCLC患者的免疫功能状态，而且对NSCLC分期、分型具有一定参考价值。
　　3. iPDMS微阵列技术小型化、高通量、多指标、低成本的特点为免疫学研究提供了极大的方便，具有一定的科研和临床应用前景。

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前言

第一部分 iPDMS多肽微阵列技术应用于非小细胞肺癌诊疗的研究

1 材料和方法

2 结果

3 讨论

第二部分 iPDMS蛋白质微阵列技术应用于非小细胞肺癌诊疗的研究

1 材料与方法

2 结果

3 讨论

结论

参考文献

综述: 肺癌血清自身抗体及其应用的研究进展

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