红景天苷通过抑制内质网应激减少高同型半胱氨酸诱导的人脐静脉内皮细胞的损伤

摘要

目的：研究红景天苷对高同型半胱氨酸诱导的内皮细胞损伤的保护作用及其机制。
　　方法：实验一部分：使用不同浓度（0.25 mmol/L、0.5 mmol/L、1 mmol/L、2 mmol/L、
　　4 mmol/L）同型半胱氨酸（Homocysteine，Hcy）刺激人脐静脉内皮细胞（human umbilical vein endothelial cells, HUVECs），处理24小时后，使用MTT法检测HUVECs生存率。实时荧光定量PCR法（Realtime PCR，rtPCR）检测免疫球蛋白重链结合蛋白（binding immunoglobulin protein，Bip）和C/EBP同源蛋白（transcriptional factor C/EBP homologous protein，CHOP）的基因转录水平。Western blot法检测Bip、CHOP蛋白表达水平，PKR内质网激酶（protein kinase RNA(PKR)-like ER kinase，PERK）、内质网核信号转导蛋白1α（inositol-requiring protein-1α，IRE1α）、磷酸化水平。
　　实验二部分：预先使用不同浓度的红景天苷（Salidroside，Sal）（3μmol/L、30μmol/L、300μmol/L）预处理HUVECs2小时，再根据实验一的结果，挑选出合适浓度的Hcy（1mmol/L），加入HUVECs中共同培养一段时间。使用实验一介绍方法检测各指标。
　　结果： Hcy组细胞生存率低于空白对照组（P<0.05），Bip和CHOP的基因表达量和蛋白表达量显著升高（P<0.05），PERK和 IRE1α的磷酸化水平在较短时间内升高（P<0.05）。高浓度红景天苷（300μmol/L）与Hcy共同作用组的细胞生存率显著高于仅有Hcy刺激的实验对照组（P<0.05），并且Bip和CHOP的基因表达和蛋白表达均下降（P<0.05），PERK和 IRE1α的磷酸化水平均下调（P<0.05）。
　　结论：红景天苷对高同型半胱氨酸诱导的HUVECs损伤具有保护作用，机制可能与抑制内质网应激信号通路的活化有关。

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引言

实验一 高同型半胱氨酸对内皮细胞的损伤作用及机制

一、材料与方法

二、结果

三、讨论

实验二 红景天苷对高同型半胱氨酸诱导的内皮细胞损伤的保护作用及机制

一、材料与方法

二、结果

三、 讨论

结论

参考文献

综述: 动脉粥样硬化中内质网应激的作用研究

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