一氧化氮在七氟醚后处理减轻大鼠离体心脏缺血再灌注自噬和凋亡中的作用

摘要

目的：
　　研究一氧化氮（nitric oxide，NO）在七氟醚后处理减轻大鼠离体心肌缺血／再灌注自噬和凋亡中的作用。
　　方法：
　　取雄性SD大鼠建立Langendorff离体灌流模型，采用随机数字表法分为6组（n＝19）：假手术组（SHAM组）、单纯七氟醚组（SEVO组）、缺血再灌注组（I/R组）、七氟醚后处理组（SEVOP组）、七氟醚后处理＋非选择性一氧化氮合酶（nitric oxide synthase，NOS）抑制剂L-NAME组（SEVOP＋L组）、L-NAME组。除SHAM组、SEVO组平衡30 min持续灌注2.5 h外，余下4组平衡30 min，缺血30 min，再灌注2 h。SEVO组于第60 min时灌注3％七氟醚15 min。SEVOP组和L-NAME组于再灌注即刻分别给予3%七氟醚15 min和L-NAME（100μmol/L）60 min。SEVOP＋L组于再灌注即刻同时给予相同计量的七氟醚和L-NAME。再灌注2 h结束后，采用氯化三苯基四氮唑（TTC）染色法计算心肌梗死范围，分光光度法测心肌组织NOS活性、硝酸还原酶法测NO含量，透射电镜观察自噬小体形成情况，Western Blot技术检测蛋白（Beclin1、Bcl-2和Caspase-3）表达水平。
　　结果：
　　SEVO组与SHAM组各指标差异无统计学意义（P>0.05）；与SHAM组比较，I/R组梗死范围增加，NOS活性、NO含量下降，Bcl-2表达下调，Beclin1、Caspase-3表达上调（P<0.05）。
　　与I/R组比较，SEVOP组梗死范围减少，NOS活性增强，NO含量增加，Bcl-2表达上调，Beclin1、Caspase-3表达下调（P<0.05）。
　　与SEVOP组比较，SEVOP＋L组梗死范围增加，NOS活性及NO含量下降，Bcl-2表达下调，Beclin1、Caspase-3表达上调（P<0.05）。
　　结论：
　　七氟醚后处理减轻大鼠离体心肌缺血／再灌注损伤可能与其增加NO含量，上调Bcl-2蛋白表达，从而抑制再灌注期间细胞自噬和凋亡有关。

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序言

第一部分 一氧化氮在七氟醚后处理保护大鼠离体心肌缺血再灌注损伤中的作用

引言

材料与方法

结果

小结

附图及附表

第二部分 一氧化氮在七氟醚后处理保护大鼠离体心肌缺血再灌注损伤自噬和凋亡中的作用

引言

材料和方法

结果

小结

附图

讨论

一．模型建立评价

二．一氧化氮信号分子

三．NO－Bcl-2－凋亡途径

四．NO－Bcl-2－自噬途径

五．自噬和凋亡之间的关系

六．局限性与创新点

结论

参考文献

综述:线粒体自噬在心肌保护中的调节机制

中英文对照缩略词表

攻读硕士学位期间公开发表的论文及科研成果

致谢