ATP柠檬酸裂解酶在乳腺癌中的表达及治疗应用

摘要

ATP柠檬酸裂解酶是催化柠檬酸生成乙酰辅酶A的关键胞质酶,而乙酰辅酶A又是内源性合成脂肪酸和胆固醇的关键物质并参与相关重要蛋白的修饰。乳腺癌自发病起就是一种全身性疾病，是女性最常见的恶性肿瘤之一，近年来乳腺癌的治疗模式发生了显著变化，个体化治疗观念逐渐盛行，靶向治疗成为乳腺癌治疗的重要组成部分，乳腺癌是一类典型的糖酵解和脂肪酸合成显著增加的恶性肿瘤，因此针对代谢失调的治疗方法可能成为乳腺癌治疗的一个新方向。
　　目的：
　　探究ATP柠檬酸裂解酶（ACLY）在乳腺癌患者癌组织及癌旁组织中表达情况及其临床意义；研究ACLY-siRNA干扰MCF-7细胞后，癌细胞ACLY水平及细胞生长状况的改变，探讨ACLY作为乳腺癌治疗靶点的可能性。
　　方法：
　　1. Western blotting检测乳腺癌组织、癌旁组织内ACLY及p-ACLY的表达；
　　2.免疫组化检测乳腺癌组织内P-ACLY表达量并与乳腺癌临床病理指标进行对比研究；
　　3. ACLY siRNA转染MCF-7乳腺癌细胞株，PCR检测ACLY mRNA, Western blotting检测蛋白表达，CCK8检测细胞增殖、FCM检测细胞凋亡。
　　结果：
　　1. Western blotting证实乳腺癌组织中无论是ACLY还是p-ACLY均显著高于癌旁组织；
　　2.免疫组化发现乳腺癌组织中p-ACLY显著高表达，与肿瘤大小、病理分级、淋巴结转移情况及Ki-67表达水平有关；与ER、PR、Her-2表达无关；
　　3. ACLY-siRNA转染人乳腺癌MCF-7细胞后，癌细胞中ACLY无论mRNA水平还是蛋白水平均显著下降；细胞增殖受抑制而细胞凋亡上升。
　　结论：
　　乳腺癌组织中 ACLY较癌旁组织中明显增高，且 ACLY的表达与乳腺癌的肿瘤大小、病理分级、淋巴结转移情况及Ki-67表达水平有关，通过抑制肿瘤细胞中ACLY的表达可以显著抑制肿瘤细胞的增殖，促使其凋亡，因此我们也许可以利用这一特性，探究出一种新的乳腺癌靶向治疗的方法。

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引言

第一部分 ATP柠檬酸裂解酶在乳腺癌组织及癌旁组织中的表达及其临床意义

一、试剂和材料

二、实验方法

三、实验结果

第二部分 siRNA干扰对人乳腺癌细胞株中ATP柠檬酸裂解酶的表达及细胞生长的影响及其临床意义

一、 试剂和材料

二、实验方法（人乳腺癌细胞株MCF-7的培养及处理）

三、实验结果

讨论

结论

参考文献

综述:ATP柠檬酸裂解酶在细胞代谢及肿瘤治疗中的重要作用

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