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PD1鼠源抗体的人源化及其活性鉴定

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The humanization of PD1 murine antibody and verifi

Abstract

目 录

引言

材料与方法

1. 实验材料

1.1 主要仪器与设备

1.2 主要试剂和材料

1.3 主要试剂配方

1.4 主要载体、宿主菌和细胞系

2. 实验方法

2.1 杂交瘤细胞RNA提取

2.2 鼠源单克隆抗体亚型鉴定

2.3 RT-PCR

2.4 重链及轻链可变区基因PCR

2.5 核酸凝胶回收

2.6 PCR或双酶切产物清洁

2.7 TA克隆

2.8 转化

2.9 质粒小量抽取

2.10 高保真PCR扩增

2.11 双酶切反应

2.12 酶连反应

2.13 真核表达

2.14 Elisa检测

2.15 质粒中量抽取

2.16 抗体纯化

2.17 SOE-PCR

2.18 流式细胞分析

2.19 混合淋巴反应

结 果

1. PD1杂交瘤细胞RNA提取

2. PD1鼠单抗亚型鉴定

3. PD1鼠单抗重链和轻链可变区基因提取

4. PD1鼠嵌合抗体表达载体的构建

5. PD1鼠嵌合抗体小量表达及活性检测

6. PD1鼠嵌合抗体大量表达与纯化

7. PD1人源化嵌合抗体表达载体的构建

8. PD1人源化嵌合抗体小量表达及活性检测

9. PD1人源化嵌合抗体大量表达与纯化

10. PD1鼠嵌合抗体与PD1人源化嵌合抗体纯化后活性鉴定

11. PD1抗体细胞亲和力流式检测

12. 混合淋巴反应测定PD1抗体活性

讨 论

参考文献

综述 Nivolumab和pembrolizumab在靶向PD1免疫治疗中的比较

1. 引言

2. 免疫检验点

3. 抗体药物

4. 抗体人源化

5. PD1和PDL1抗体

6. Nivolumab

7. Pembrolizumab

8. Nivolumab与pembrolizumab的阻断机制

9. Nivolumab和pembrolizumab药理学比较

10. 结论

不仅抗体可变区的改造技术日益发展,抗体恒定区也被人们进行了广泛的改造,用于加强或减弱ADCC、ADC

参考文献

致 谢

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著录项

  • 作者

    吴超;

  • 作者单位

    苏州大学;

  • 授予单位 苏州大学;
  • 学科 细胞生物学
  • 授予学位 硕士
  • 导师姓名 杨林;
  • 年度 2017
  • 页码
  • 总页数
  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 中文
  • 中图分类 军事医学;肿瘤学;
  • 关键词

    抗体; 人源化;

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