重组单抗药物的肽图分析方法开发

摘要

恶性肿瘤，其主要危害是侵袭相邻组织或向远端脏器转移并破坏侵袭，致机体衰亡。癌症产生的主要特征是正常的细胞周期和凋亡调节失控。由于各类癌症的病程发展速度都很快，从目前的临床实践来看，大多数癌症患者发现后为晚期，治疗难度大，预后的结果不理想。因此，癌症的治疗是全球医学界面临的重大问题。化学药物治疗在现代肿瘤内科治疗中具有很重要的作用，目前大部分化疗药物在临床上仍然作为一线药在使用。但是，由于这些化疗药物对肿瘤细胞和正常细胞均有抑制或杀伤作用，导致化疗的副作用令人难以承受，患者大多不得不使用化学药物治疗以延续生命，但并未从根本上改善患者生活质量。
　　随着分子生物学、基因工程的飞速发展和肿瘤发生发展分子机制的深入研究，抗肿瘤药物的研发也进入了一个新的阶段，出现了生物技术抗肿瘤药物，因其针对性强、多靶向性、疗效好、不良反应小等特点成为目前发展最快的抗肿瘤药物研发方向之一，例如单克隆抗体。
　　在对于单克隆抗体蛋白一级结构分析中，肽图分析方法起到至关重要的作用。建立了重组单抗药物的肽图分析方法。在变性条件下向抗体溶液加入还原剂,打开抗体内部所有交联的二硫键,再加入烷基化试剂封闭所有的自由筑基,使抗体分子在溶液中以游离伸展肽链的形式存在。加入胰蛋白酶,将充分伸展的肽链酶解成小的肽段。用反相高效液相色谱层析分析肽图谱。通过本试验的开发出的肽图分析方法实用有效,适于进行重组单抗等结构复杂的大分子蛋白药物的肽图检查分析。

目录

声明

1 引言

1.1研究背景

1.2研究目的

2 研究方法和概述

2.1研究来源

2.2技术路线

2.3研究供试品基本情况

2.4原有肽图分析方法情况

2.5研究方法及步骤

3 分析结果

3.1酶切时间考察

3.2柱温考察

3.3肽段峰归属鉴定及特征峰

3.4分析方法专属性验证

3.5分析方法重复性验证

4 结果讨论

4.1酶切时间考察

4.2柱温考察

4.3肽段峰归属鉴定及特征峰

4.4分析方法专属性验证

4.5分析方法重复性验证

5 结论与建议

5.1酶切时间、柱温考察及肽段峰归属鉴定及特征峰的建议

5.2分析方法专属性和重复性验证的建议

参考文献

7 综述

8 攻读硕士学位期间发表的学术成果

致谢