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RhoA/ROCK信号通路在脂多糖诱导内皮细胞损伤中的作用及二苯乙烯苷(TSG)的干预研究中文摘要
目 录
第一章 绪论
第二章 材料与方法
2.1 研究资料及仪器设备
2.1.1 研究对象
2.1.2 主要仪器与试剂
2.1.3 主要溶液配制
2.2 实验流程与方法
2.2.1 细胞培养与鉴定
2.2.2 细胞冻存
2.2.3 细胞复苏
2.2.4 实验分组
2.2.5 MTT法
2.2.6 鬼笔环肽(Phalloidine)染色
2.2.7 siRNA转染
2.2.8 蛋白样品提取
2.2.9 蛋白质定量(BCA法)及配平
2.2.10 Western Blot
2.2.11 Annexin V-FITC/PI凋亡检测
2.2.12 LDH释放检测
2.2.13 统计学处理分析
第三章 结果
3.1 内皮细胞鉴定
3.2 LPS对HUVECs细胞的毒性作用
3.2.1 LPS降低内皮细胞存活率
3.2.2 LPS促进HUVECs的LDH释放
3.2.3 LPS促进HUVECs的凋亡
3.3 TSG显著抑制LPS诱导的HUVECs细胞毒性
3.3.1 TSG显著提高LPS诱导的内皮细胞存活率的降低
3.3.2 TSG显著抑制LPS诱导的LDH释放
3.3.3 TSG显著抑制LPS诱导的内皮细胞凋亡
3.4 TSG抑制LPS诱导的RhoA表达
3.5 TSG显著抑制LPS诱导的ROCK表达及活化
3.5.1 TSG显著抑制LPS诱导的ROCK表达
3.5.2 TSG显著抑制LPS诱导的ROCK活化
3.6 干扰RhoA/ROCK通路可显著降低LPS诱导的细胞毒性
3.6.1 RhoA、ROCK1、ROCK2沉默的鉴定
3.6.2 沉默RhoA/ROCK信号通路可显著提升内皮细胞存活率
3.6.3 沉默RhoA/ROCK信号通路可显著降低LPS诱导的LDH释放
3.6.4 沉默RhoA/ROCK信号通路可显著降低LPS诱导的内皮细胞凋亡
3.7 沉默RhoA/ROCK信号通路可显著改善LPS诱导的F-actin骨架形态变化
3.8 TSG可显著抑制LPS诱导的F-actin骨架改变
第四章 讨论
第五章 结论
参考文献
综 述RhoA/ROCK信号通路及与内皮功能障碍
RhoGTP酶
ROCK亚型的结构、分布、表达和功能
RhoA/ROCK信号通路与内皮屏障
RhoA/ROCK通路抑制
参考文献
英文缩写词表
致 谢