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血复生对免疫介导再障小鼠骨髓CD28、CTLA4表达及IFN-γ、TNF-α水平的影响

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目的:探讨院内制剂血复生治疗再生障碍性贫血(以下简称再障)的作用环节,建立免疫介导小鼠再障模型,检测小鼠骨髓T细胞表面CD28、CTLA4表达以及血清和脾淋巴细胞(SPL)培养液IFN-γ、TNF-a水平,了解血复生对细胞免疫及造血负调控因子水平的影响。 方法:成功建立免疫介导型再生障碍性贫血小鼠模型,设立正常对照组,模型对照组,血复生用药组,环孢菌素组,血复生加环孢菌素组;检测各组小鼠血常规、骨髓单个核计数以及骨髓病理改变:将骨髓单个核细胞体外加入含有PHA(终浓度为15μg/L)的液体培养基,培养48h,用双色免疫荧光标记流式细胞术检测培养前后各组小鼠骨髓T细胞表面CD28、CTLA4表达的变化;提取脾脏淋巴细胞,体外加PHA培养48h,用ELISA法检测脾脏淋巴细胞培养上清液以及小鼠血清IFN-γ TNF-a水平的变化。 结果:血复生组与模型组对比,血复生加环孢菌素组与环孢菌素组对比,血象、单个核细胞计数前者均明显高于后者;骨髓病理前者较后者骨髓增生度改善,造血细胞明显增多(P<0.05);CD28的表达血复生组明显低于模型组(P<0.05),血复生加环孢菌素与环孢菌素组对比,差异无统计学意义(P>0.05);CTLA4的表达对比,差异无显著性(P>0.05);脾淋巴细胞培养上清液血复生单独用药组与模型组对比,环孢菌素加中药组与环孢菌素组对比IFN-γ TNF-a水平检测前者明显低于后者(P<0.05)。 结论:中药复方制剂血复生单独应用对调整再障免疫紊乱,促进造血功能恢复有积极作用;联合环孢菌素增强其免疫调节作用,对本病治疗具有协同效应。

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