补肾益肝活血中药血清对小鼠骨髓基质细胞成软骨分化的影响

摘要

研究背景:膝骨性关节炎(OsteoarthritisOA,knee)是以膝关节软骨变性、破坏及骨质增生和出现不同程度的膝关节僵硬以及不稳定,导致功能减退,甚至丧失等为主要特征,是中老年人常见、多发和比较难治的一种慢性进行性骨关节病。在我国38-60岁人群中78.5％的人患有骨关节炎,成为功能减退、生活质量下降的主要原因之一。其治疗目标是控制疼痛,改善关节活动功能及生活质量,抑制疾病的进程,尽可能避免治疗带来的各种副作用。
　　 目的:观察补肾益肝活血方药效血清对小鼠骨髓基质细胞成软骨分化的影响,为膝关节骨关节炎的防治提供新的途径。
　　 方法:1.选择清洁型昆明小鼠,约18-20g,依据表面积换算法,按7.33g生药/kg灌胃,每天1次,连续7天,后摘眼球取血,制备中药血清,低温保存。2.选择清洁型昆明小鼠,采用贴壁培养法从股骨,胫骨骨髓中分离出骨髓基质细胞,并进行培养及增殖。3.取F1代细胞进行成软骨分化实验,分对照组及实验组。对照组:仍以原培养基培养;实验组:在原培养基中加入补肾益肝活血方中药血清,定向诱导其向软骨细胞分化。5天后,RT-PCR检测Ⅱ型胶原,SOX9的mRNA表达。
　　 结果:收集细胞经RT-PCR扩增后,实验组Ⅱ型胶原及SOX9的mRNA表达量较对照组明显增加。
　　 结论:补肾益肝活血方药效血清可定向诱导小鼠骨髓基质细胞向软骨方向分化。