江西病媒昆虫蚋科分子鉴定研究

摘要

蚋(Diptera:Simuliidae)不仅叮刺吸血，同时还会传染疾病，是一种十分重要的人畜共患病的病媒昆虫，因此许多国家都非常重视对蚋的生态习性及防治的研究工作。但并不是所有的蚋都会传播疾病，因此精确的鉴定蚋种便成为这些工作的基础。由于蚋的形态高度相似性，尤其是同一种团内的近缘种难以用形态学方法进行鉴定，细胞遗传学方法虽然可对近缘种进行鉴别，但是操作费时且需要特定发育阶段的样本。所以利用分子方法等多种综合手段对蚋科昆虫的分子分类和系统发育进行研究分析，是非常有必要的，同时也可以为蚋的防控研究奠定基础。
　　本文对江西省7个标志地点进行标本采集并分析，根据形态学分类方法将所采集标本进行分类，得到4种形态种。纺蚋亚属的黄毛纺蚋S.aureohirtumnr。蚋亚属的五条蚋S.quinquestriatum、双齿蚋S.bidentatum和爬蚋S.reptans，其他标本鉴定到属，其中爬蚋S.reptans是江西未记录种。将已经鉴定过的标本提取线粒体基因COI片段，利用MEGA5.0对其进行成分、系统发育和种间遗传差异的分析，得到的结果与形态鉴定的结果相一致。同时利用PCR步移法对S.aureohirtumnr的线粒体基因组全序列进行了测定和分析。得到的结果表明S.aureohirtumnr的线粒体基因组基因的排列方式与假想昆虫祖先的排列方式trnI-trnQ-trnM相一致。
　　本研究为我国蚋科昆虫的分子研究及江西省蚋科昆虫的分类研究做出了一定的贡献，对进一步厘定江西蚋科昆虫的分类及基于分子方法对其行鉴定具有重要作用。

目录

声明

第1章 综述

1.1蚋科昆虫简介

1.2江西蚋科昆虫的分类现状

1.3 蚋科昆虫分子研究进展

1.3.1 利用DNA条形码对蚋科昆虫进行分子研究

1.3.2利用多种序列、标记对蚋科昆虫进行分析

1.3.3蚋科昆虫的分子系统发育研究

1.3.4多基因标记对蚋科昆虫的系统发育研究

1.3.5 讨论以及展望

1.4线粒体基因组简介

1.4.1 线粒体概述

1.4.2 线粒体基因组的组成及双翅目昆虫的线粒体基因组特征

1.5 线粒体基因组测序方法

1.5.2 引物步移法(Primer Walking)

1.5.3 LA-PCR测序技术((Long and accurate polymerase chain reaction))

1.6 双翅目昆虫线粒体基因组研究进展

1.7 研究的意义和目的

第2章 利用DNA条形码技术对江西蚋科进行鉴定

2.1 材料和方法

2.1.1 材料

2.1.2 DNA的提取

2.1.3 COI基因PCR扩增

2.1.4 胶的制备及PCR产物的检测

2.1.5 DNA序列数据的处理及分子系统树构建

2.2 结果和分析

2.2.1 物种鉴定结果

2.2.2 COI基因PCR扩增结果

2.2.3 COI基因序列分析

2.2.4 COI基因遗传距离及系统发育分析

2.3 讨论与分析

第3章 黄毛纺蚋S. aureohirtum线粒体基因组全序列测定

3.1材料与方法

3.1.1供试虫形态鉴定和标本保存

3.1.2 实验流程

3.2结果与分析

3.2.1 黄毛纺蚋mtDNA基因组结构

3.2.2 黄毛纺蚋mtDNA基因的碱基组成

3.2.3 蛋白质编码基因分析

3.2.5 非编码区

3.3结论与展望

参考文献

致谢