中华绒螯蟹蜕皮抑制激素1（Ers-MIH1）-GST融合蛋白在大肠杆菌中的表达

摘要

蜕皮抑制激素(molt-inhibiting hormone,MIH)属甲壳动物高血糖激素家族.该家族的成员包括:甲壳动物高血糖激素(crustacean hyperglycemic hormone,CHH)、蜕皮抑制激素(molt-inhibiting hormone,MIH)、性腺发育抑制激素(vitellogenesis/gonad-inhibiting hormone,VIH/GIH)、大颚器官抑制激素(mandibular organ-inhibiting hormone,MOIH),这些激素成熟肽的分子量约7-9 kD,通常由70-78个氨基酸残基组成,氨基酸序列相似,均有6个保守的半胱氨酸残基,形成3个二硫键.MIH产生于端髓X-器官(MTXO),储存在眼柄的窦腺中,抑制Y-器官蜕皮素的合成,参与调控甲壳动物的生长和发育等重要的生理活动.尽管最近在MIH的结构和功能的理解上取得了一些进展,但仍有许多重要的问题有待回答.MIH详细的作用机制还不清楚,在生长发育过程中的表达情况也还不十分清楚.为确定MIH的结构、功能和分子作用机制,作为起始的第一步,我们报道了中华融螯蟹蜕皮抑制激素1在大肠杆菌中的融合表达.第一章:甲壳动物神经肽的结构和功能.第二章:中华绒螯蟹蜕皮抑制激素1(Ers-MIH1)基因的PCR克隆.第三章:重叠延伸拼接法从基因组DNA中获得Ers-MIH1基因的编码区.第四章:中华绒螯蟹蜕皮抑制激素1基因Ers-MIH1原核表达载体的构建.第五章:Ers-MIH1基因融合蛋白在大肠杆菌中的表达.

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摘要

Abstract

前言

第一章甲壳动物神经肽的结构和功能

第二章中华绒螯蟹蜕皮抑制激素1(Ers-MIH1)基因的PCR克隆

材料和方法

结果

讨论

参考文献

第三章重叠延伸拼接法从基因组DNA中获得Ers-MIH1基因的编码区

材料和方法

结果

讨论

参考文献

第四章中华绒螯蟹蜕皮抑制激素1基因Ers-MIH1原核表达载体的构建

材料和方法

结果

讨论

参考文献

第五章Ers-MIH1基因融合蛋白在大肠杆菌中的表达

材料和方法

结果

讨论

参考文献

致谢