一株广谱内生真菌B3对水稻生长及生理影响研究

摘要

从重阳木茎内皮中筛选到一株内生真菌B3，经鉴定为半知菌类的拟茎点霉属(Phomopsissp.)，前期实验表明该菌株能大量分泌漆酶，具有较强的降解秸杆能力，同时对水稻有一定的促生长作用。本研究论文旨在进一步阐述内生真菌B3促水稻生长的机制。 水稻盆栽试验表明，通过内生真菌B3菌丝体接种能从水稻叶片重新分离得到该菌株，在叶鞘和根系未分离到，说明内生真菌B3的定植具有组织专一性，内生真菌B3是一株广谱内生菌，与科外植物水稻能建立共生关系。水稻叶片组织的染色观察也证实了上述结论。 在水稻苗期(四叶期)分别施加内生真菌B3菌剂、无菌发酵液、灭菌培养基，CK为全空白处理。实验结果表明施加B3菌剂能有效调节水稻体内保护酶活力和根系活力，并对稻瘟病表现出一定的抗性，是多种因素的协同作用，这为开发一种新型的水稻生长生态调节剂提供了理论基础。对水稻整个生育期生长、生理的影响研究表明接种内生真菌B3表现出良好的促生长作用、能有效刺激水稻体内保护酶系统活力和增强净光合速率(Pn)，B3菌的发酵液、菌丝均能有效提高水稻产量。小区试验也表明施加B3菌剂对水稻有一定的增产作用，毒理实验证明了B3菌处理的稻谷的安全性。所以该内生真菌有望被开发为一种多功能的微生物制剂，既是一种高效秸杆降解剂应用于农业生产以提高土壤肥力；又是水稻生长生态调节剂，对水稻增产稳产发挥重要作用。 对该菌株的生理特性研究表明它能分泌IAA和ABA两种激素，发酵液中含有VB1。菌丝体含有16种游离氨基酸和多种脂肪酸，内生真菌B3和宿主水稻之间可能存在物质和能量交换。内生菌B3促进水稻生长的原因是多样的，其中分泌植物激素是较为直接的原因；合成水稻必需的氨基酸、维生素、脂肪酸在促进生长上有一定作用。 对液体B3发酵菌剂进行优化筛选，结果表明以尿素为N源、以麦芽糖为C源的B3发酵菌剂具有与原始B3发酵菌剂表现出类似的生物活性。正交设计表明B3发酵菌剂生物量最大的优化组合是C源：20g/L，N源：0.5g/L，发酵天数为2d。考虑到液体剂型的保质期较短，真菌微生物制剂多是利用其孢子，所以探讨了内生真菌产孢的条件，结果显示诱导内生真菌B3产孢需要多种外界环境因子和理化因素等条件，添加宿主植物的浸汁和紫外线刺激是诱导内生真菌产孢的有效方法。

目录

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前 言

第一章一株广谱内生真菌对水稻生长及生理特性的影响

第一节内生真菌B3侵染水稻及重新分离——互惠共生体系的建立

1实验材料与方法

2结果与分析

参考文献

第二节水稻接种内生真菌生理特性的变化及其对稻瘟病的抗性研究

1材料与方法

2结果与分析

3讨论

4结论

参考文献

第三节广谱内生真菌B3对水稻整个生育期生长、产量及生理特性的影响

1材料与方法

2结果与分析

3讨论

4结论

参考文献

第五节感染内生真菌水稻稻谷的毒理试验

1实验材料与方法

2结果与分析

3结论

第二章 内生真菌B3促进水稻生长的机理研究

1材料与方法

1.1材料

1.2生长曲线的测定

1.3 B3菌株和水稻叶片脂肪酸成分分析

1.4 B3菌株、水霉、轮枝霉、疫霉SOD酶活力的测定

1.5水溶性维生素的定性检测(TLC法)

1.6 B3菌株与水稻叶片游离氨基酸成分分析

1.7 B3菌株发酵液激素的检测

2结果与分析

2.1 B3菌株生长曲线

2.2 B3发酵液中激素检测结果

2.3 B3菌株与不同水稻品种游离氨基酸成分分析

2.4水溶性维生素检测结果(VB1)

2.5 B3菌株与水稻叶片脂肪酸成分分析

2.6四种真菌SOD酶活力比较

3 讨论

参考文献

第三章水稻调理菌剂B3的优化筛选及剂型的初步研究

第一节水稻调理菌剂B3液体发酵培养基的优化筛选

1材料与方法

2 结果与分析

3 讨论

参考文献

第二节水稻调理菌剂剂型的初步研究及内生真菌B3产孢条件探讨

1 材料与方法

2 结果与分析

3讨论

参考文献

小结

研究综述——微生物源的植物生长促进剂的研究新进展

附录：攻读硕士学位期间发表论文情况

致谢