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建鲤雌核发育及人工转性的研究

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第一章 文献综述:鱼类的雌核发育研究

第二章 建鲤雌核发育及人工转性的研究

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摘要

鱼类中,雌雄性别成熟迟早以及生长速度存在性别差异是普遍现象。在长江流域的天然水域中,大部分雄性鲤鱼一龄性成熟,而雌性需要二龄才能性成熟,二龄雌性鲤鱼的平均体重比同龄的雄性鲤鱼高出约30%。在池养条件下,自性腺开始分化时,雌性鲤鱼就显示出比雄性生长迅速的趋势。如果能培育出全雌鲤鱼,仅利用性别的生长差异,就可增产10%。因此,全雌鲤鱼育种不仅具有重要的理论意义,而且具有直接的生产意义。 培育全雌鲤的关键技术是雌核发育和人工转性。因此本文拟以优良鲤鱼品种建鲤为研究对象,进行了人工雌核发育及人工转性研究,为全雌建鲤育种打基础。在优化紫外灭活精子有关参数的基础上,用紫外灭活的红鲫精子刺激建鲤卵子雌核发育,然后在2-细胞期进行热休克处理,加倍染色体,以较高比率获得了雌核发育育苗。当雌核发育鱼苗长至1.0-1.5cm,立即投喂含17α-甲基睾丸酮的饲料进行人工转性。在转性鱼中,出现了Ⅰ型、Ⅱ型、Ⅲ型和Ⅳ型四种类型。建鲤和红鲫之间存在着广泛的、显著的扩增条带差异,RAPD技术可准确地区分建鲤和红鲫。近20个引物的分析表明,Ⅰ型鱼表现出与建鲤完全相同的带型,未见红鲫基因,Ⅳ型鱼则同时出现建鲤和红鲫的条带,因此,Ⅰ型为雌核发育鱼,Ⅳ型为杂交鱼。Ⅱ型和Ⅲ型则有待进一步鉴定。同时,用流式细胞仪测定了发育正常的Ⅰ型雌核发育鱼和对照组建鲤的DNA含量。雌核发育鱼DNA含量与对照组DNA含量没有显著差异,说明Ⅰ型雌核发育鱼为正常的二倍体。 在优化紫外灭活精子有关参数的基础上,用紫外灭活的红鲫精子刺激建鲤卵子雌核发育,然后在2-细胞期进行热休克处理,加倍染色体,以较高比率获得了雌核发育鱼苗,初步建立了建鲤人工雌核发育技术;以灭活的异源精子进行雌核发育诱导,并结合RAPD分析和DNA含量测定,可准确地鉴别雌核发育鱼;人工转性成功率75%,并获得了“假雄性”建鲤39条。

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