鸡马立克肿瘤发生后2号染色体微卫星标记变化的研究

摘要

目 的 微卫星不稳定性(microsatellite instability，MSI)广泛存在于人类肿瘤的基因组中。然而动物肿瘤的微卫星不稳定性还没有相关的实验报告。通过对鸡2号染色体上部分微卫星不稳定性进行研究，旨在发现是否存在与马立克肿瘤发生相关的宿主基因组改变，为从宿主的角度研究鸡马立克肿瘤发生和发展的生物学、抗病育种的遗传学、分子诊断等方面提供基础资料。 方 法 在鸡2号染色体上选取44个微卫星位点并合成引物。选取10例鸡马立克肿瘤组织及同源正常组织，抽提DNA后PCR扩增，琼脂糖电泳初步筛选、变性聚丙烯酰胺凝胶电泳后观察结果。对照比较肿瘤组织DNA与自身正常组织DNA的微卫星条带，分析微卫星不稳定性和杂合性缺失(loss of heterozygosity，LOH)情况。 结 果 44个微卫星位点中共有8个微卫星位点出现MSI变化，其中ABR8、ABR153和ABR659三个位点的发生率较高，为8／10、7／10和8／10。另外ABR107和ABR520两个位点的发生率分别为4／10、2／10，其它位点的发生率都较低，为1／10。 共有8个微卫星位点出现LOH变化，其中ABR4、ABR107和ABR189三个位点的发生率较高，为8／10、4／10、6／9，其它位点的发生率较低，均为1／10(ABR493为1／9)。应用ABR107、ABR4和ABR8的组合就能覆盖所研究的10个样品，进行鸡马立克肿瘤MSI的分子诊断，以及8个样品进行马立克肿瘤LOH的分子诊断。 结 论 首次发现鸡马立克肿瘤在2号染色体上存在微卫星不稳定性。马立克肿瘤可出现多个微卫星位点的改变，提示马立克肿瘤的发生、发展涉及不同基因的多部位、多步骤改变。以PCR、电泳为基础的微卫星技术可以快速、有效地检测出染色体内部的微小缺失和基因组的不稳定性，并予以定位。为研究马立克肿瘤的发病机制及分子诊断提供了一个有价值的方法，也为马立克抗病育种提供了分子标记的基础资料。

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文摘

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前言

论文说明：文中所引部分缩略语

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第一部分文献综述 第一章微卫星改变与肿瘤发生

第二部分试验研究 第二章某鸡场散发马立克肿瘤的诊断

第二部分试验研究 第三章鸡马立克肿瘤发生后2号染色体微卫星标记变化的研究

全文小结

致谢

附录试验中配液