鸡滑液囊支原体的分离鉴定及部分生物学特性研究

摘要

鸡滑液囊支原体(Mycoplasmasynoviae，MS)可引起鸡滑液囊炎，该病是鸡的一种急性或慢性传染病，以侵害关节的滑液囊膜及腱鞘为主，引起关节渗出性滑膜炎、腱鞘炎及跗关节和脚垫肿胀。鸡群感染该病可导致明显的跛行，生长发育迟缓及酮体降级等，并且与呼吸道疾病有关。与鸡毒支原体(Mycoplasmagallisepticum，MG)一样，鸡滑液囊支原体感染已遍及全球。在我国，无论是商品肉鸡、蛋鸡或种鸡，MS感染均有发生，给养鸡业造成巨大的经济损失。
　　本研究通过鸡滑液囊支原体的分离鉴定、生长特性、人工感染试验、免疫抗体水平的测定等方面的试验，结果如下:
　　(1)鸡滑液裘支原体的分离与鉴定:2012年通过对河南、江苏、广东等省鸡场疑似MS感染的病鸡，无菌采集肿胀跗关节腔内的关节液及内容物进行鸡滑液裘支原体的分离鉴定。从采集的102份有腿瘫症状病鸡的肿胀爪垫或附关节内容物中分离出10株鸡滑液囊支原体，分离率为7.14％～14.29％，平均分离率9.8％。本试验结合菌落形态、染色镜检、红细胞吸附、L型细菌鉴定、生化试验、血清学试验、分离菌株v1hA基因的克隆及序列分析、人工感染试验等，确诊本次分离的菌株为鸡滑液囊支原体。4株(HN01、JS01、JS02、GD01)分离菌株的药物敏感试验结果表明:鸡滑液囊支原体对泰乐菌素、百里霉素高度敏感，而对林壮合剂、盐酸林可霉素和罗红霉素具有明显的抵抗力。
　　(2)鸡滑液囊支原体的生物学特性:分离株生长过程中的CCU的变化范围为3～9CCU/ml，在36h～40h之间达到MS的生长高峰期，培养滴度可达109CCU/ml。分离菌株培养液在-70℃保存期可达1个月以上，-20℃保存7d，-4℃保存2d，25℃条件下只能存放1d。若在MS中加入30％灭菌甘油，在-20℃保存期达21天，-70℃保存期至少12个月。鸡滑液囊支原体攻毒模型的建立，4株(HN01、JS01、JS02、GD01)分离菌株分别爪垫接种SPF鸡，都能引起鸡只发生典型的MS临床症状及病理变化，并且能从感染的鸡只中再次分离到MS。经静脉注射途径也可以复制出典型的MS临床病例，但发病率低于爪垫注射组。免疫抗体水平的测定试验结果表明:采用MS分离菌株(HN01株)制备的灭活疫苗免疫后14天抗体水平迅速升高，免疫后21天，S/P值均大于0.5，判定为阳性，免疫鸡抗体水平显著高于对照鸡，说明MS分离菌株（HN01株）具有良好的免疫原性。

目录

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摘要

文中所引部分缩略语

第一章 文献综述

1 鸡滑液囊支原体的病原学

2 流行病学

3 致病机理

4 临床症状和病理变化

4．1 临床症状

4．2 病理变化

5 鸡滑液囊支原体的诊断

5．1 病原体的分离和鉴定

5．2 血清学方法

5．3 分子生物学方法

6 鸡滑液囊支原体疫苗的研究进展

7 预防和治疗

7．1 药物治疗

7．2 免疫接种

7．3 综合措施

参考文献

第二章 鸡滑液囊支原体的分离和鉴定

1 材料和方法

1．1 病料来源

1．2 菌毒株及培养基

1．3 主要试剂及药品

1．4 实验动物

1．5 主要仪器

1．6 方法

2 结果与分析

2．1 鸡滑液囊支原体的分离情况

2．2 分离培养

2．3 L型细菌检验

2．4 鸡红细胞吸附试验

2．5 生化试验

2．6 鸡胚感染试验

2．7 血清学试验

2．8 vlhA基因的克隆及序列分析

2．9 最低抑菌浓度

2．10 鸡人工感染试验

3 讨论

参考文献

第三章 鸡滑液囊支原体部分生物学特性研究

1 材料和方法

1．1 实验菌株

1．2 培养基及试剂

1．3 实验动物

1．4 方法

2 结果与分析

2．1 活菌计数及纯粹检验

2．2 培养特性

2．3 特异性

2．4 生长曲线

2．5 不同保存条件对MS活力的影响

2．6 攻毒模型的建立

2．7 免疫抗体水平的测定

3 讨论

参考文献

全文总结

致谢

攻读硕士学位期间发表的学术论文