灰树花(Grifola frondosa)中锌的存在形态分析

摘要

锌是人体必需的微量元素之一，对人体的各种生理活动起着重要的调节作用。灰树花是一种对人体具有多种保健功效的食（药）用真菌，合有蛋白质、多糖及矿物元素等多种生物活性物质，在抗肿瘤、抗病毒及免疫调节等方面具有很好的保健作用。本文以灰树花为原料，结合微量元素分析模型，将微量元素锌的存在形态分为可溶态和悬浮态、无机态和有机态、有机结合态。优化影响锌元素提取效果的条件，使用不同提取液提取有机结合态，利用微波消解-火焰原子吸收光谱法测定各形态中锌的含量及分布。锌元素的形态分析可为灰树花的开发利用提供理论依据。
　　主要研究结果如下:
　　1、通过单因素实验和正交实验，优化了锌元素的提取工艺，对灰树花水浴液中锌元素进行了含量测定及形态分析，采用0.45μm微孔滤膜将水浴液中的锌元素分为可溶态和悬浮态，并采用微波消解-火焰原子吸收光谱法测定了锌元素的各初级形态的含量。结果表明:灰树花中微量元素锌的初级形态多以可溶态形式存在，最佳的提取条件为温度40℃，时间110min，料液比1∶45，在此条件下，可溶态中锌元素的提取率达到58.77％，残渣中也存在一部分锌，含量达到40.68％。锌在水提液中的可溶解率很高，可达到99％，悬浮态基本没有。
　　2、在微量元素锌初级形态分析的基础之上，又进行了锌元素的次级形态分析。采用D-101大孔吸附树脂将可溶态锌分为无机态锌和有机态锌，并采用微波消解-火焰原子吸收光谱法测定了锌元素的各次级形态的含量。实验设定上样量、pH、HNO3浓度以及洗脱剂类型、用量、流速等为无机态和有机态分离提取的影响因素，单因素和正交实验的结果说明:灰树花中可溶态锌中无机态分离提取的最佳条件组合是:pH4，HNO3浓度3％，用量4BV，流速2.5mL/min;有机态分离提取的最佳条件为:丙酮洗脱剂、洗脱剂用量3BV、流速为2mL/min。在此条件下，无机态锌的含量达到41.04μg/g，在可溶态中的分布达到76％左右;而有机态锌的含量只有12.50μg/g，在可溶态中的分布达到23％左右。由此可以看出，灰树花中可溶态锌主要以无机态形式存在，无机态锌的含量是有机态锌的含量的3倍多。
　　3、采用CCl4溶剂和2mol/L的HCl溶液从水浴残渣中提取有机态和无机态，测量其中的锌含量。结果表明:残渣中有机态锌的含量为3.21μg/g，在残渣中的分布为8.63％;无机态锌的含量为33.27μg/g，分布为89.48％。由此可以看出，残渣中锌元素主要以无机态形式存在，无机态锌的含量是有机态的10倍左右。
　　4、利用不同的提取液从可溶态和残渣中提取有机结合态，其中水溶态中的有机结合态是水溶性蛋白质和水溶性多糖，残渣中的有机结合态分别是盐溶性蛋白质、碱溶性蛋白质和碱溶性多糖。灰树花中锌的有机结合态分为多糖结合态和蛋白质结合态，其中蛋白质结合态为主要的存在形态，水溶性蛋白质的含量最多。实验发现，有机结合态主要存在于水溶态中，所以，水溶性蛋白质和水溶性多糖是进一步纯化研究的理想材料。

目录

声明

摘要

第一章 文献综述

1 灰树花的营养价值

1．1 灰树花的一般营养成分

1．2 灰树花的主要功能成分

2 锌的生理功能及其存在形态

2．1 锌的生理功能

2．2 锌的存在形态

2．3 锌的研究现状

3 微量元素形态分析技术

3．1 传统方法

3．2 联用技术

3．3 环境和土壤的另类分析技术

4 本研究的意义和主要内容

4．1 研究意义

4．2 研究内容

参考文献

第二章 灰树花中锌的提取分离

1 材料与方法

1．1 材料

1．2 方法

1．3 数据分析

2 结果与讨论

2．1 锌标准曲线

2．2 单因素实验结果分析

2．3 正交实验结果

2．4 可溶态中锌元素存在形态的含量及其关系讨论

2．5 可溶态中锌元素形态分析参数计算

3 本章小结

参考文献

第三章 灰树花中可溶性部分锌的形态分析

1 材料与方法

1．1 试验材料

1．2 方法

1．3 数据处理

2 结果与讨论

2．1 单因素实验结果

2．2 正交实验结果

2．3 可溶态中有机结合态的提取率及锌含量的比较

2．4 可溶态中锌元素的存在形式分析

2．5 方法的准确度和精密度

3 本章小结

参考文献

第四章 灰树花中残渣部分锌的形态分析

1 材料与方法

1．1 试验材料

1．2 方法

2 结果与讨论

2．1 残渣中有机结合态的提取率及锌含量的比较

2．2 残渣中锌元素的存在形态分析

2．3 灰树花中锌元素的存在形态分析

3 本章总结

参考文献

全文结论

创新点

攻读硕士期间已发表和录用的论文

致谢