日粮中添加胆碱对宫内发育迟缓猪肌肉组织代谢的影响

摘要

子宫内发育迟缓(IUGR)是指胎儿在子宫内发育受到阻碍，对新生动物的成活率、组织器官发育等方面均有不良影响，与正常出生体重成年动物相比瘦肉率较低、肉品质较差，对畜牧生产危害巨大。而IUGR作为研究模型，已成为近年来关注的热点。而胆碱作为动物生长发育必须的营养物质，在动物肝脏、肉、蛋、鱼、大豆及小麦种子中含量丰富，参与很多器官组织的代谢反应，对维持细胞膜完整性及甲基代谢途径等方面起到重要作用。本研究以IUGR猪为对象，研究了其在出生后早期肌肉组织中糖代谢和脂肪代谢变化的相关指标，并通过断奶后日粮中添加胆碱，探究其对宫内发育迟缓猪的调控作用，以期为养猪生产与人类医学提供理论依据与调控参考。
　　1.子宫内发育迟缓对哺乳仔猪肌肉组织糖代谢和脂肪代谢的影响
　　从胎次相近、体型相似、正常分娩的18头窝仔猪中挑选正常初生重(NBW)和宫内发育迟缓(IUGR)的新生仔猪各18头，保证所选的每头IUGR均有对应NBW同胞仔猪，并随母猪哺乳至23d断奶，分别为N组（NBW猪）、I组（IUGR猪）。当仔猪饲养至7和23日龄时，分别从每组随机选择4头，公母各半，取肌肉组织，测定其糖代谢酶活、糖异生关键酶基因及调控因子mRNA表达量的变化。结果表明:(1)7日龄时，与NBW组相比，IUGR组仔猪乳酸脱氢酶(LDH)，琥珀酸脱氢酶(SDH)以及磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PEPCK)和葡萄糖-6-磷酸酶(G-6-Pase)的活性显著提高(P＜0.05)，且IUGR有提高（肌酸激酶）CK活性的趋势（P=0.070）;与正常初生重仔猪相比，IUGR可显著提高糖原合成酶(GS)和M-型6磷酸果糖激酶(PFKM)的mRNA表达量（P＜0.05），且M2-型丙酮酸激酶(PKM2)的mRNA表达量有升高趋势（P=0.077）;在23日龄时，与正常初生重仔猪相比，IUGR组仔猪LDH活性有升高趋势(P=0.053)，显著降低PEPCK和G-6-Pase的活性(P＜0.05)，但对SDH活性影响不显著（P＞0.05）;与NBW组相比，IUGR组仔猪GS的mRNA显著降低(P＜0.05)，而PFKM的mRNA表达量显著升高(P＜0.05)，但IUGR组仔猪的GLUT4和PKM2 mRNA表达量无显著变化（P＞0.05）。(2)在7日龄时，与NBW组相比，IUGR组仔猪乙酰辅酶A羧化酶(ACC)和肌肉型-脂肪酸肉碱棕榈酰转移酶(M-CPT)的活性显著提高（P＜0.05）;与正常初生重仔猪相比，IUGR可显著提高M-CPT和胆固醇调节元件结合蛋白(SREBP1)的mRNA表达量(P＜0.05)，且ACC的mRNA表达量有升高趋势（P=0.059），但对脂肪酸合成酶(FAS)无显著影响（P＞0.05）;在23日龄时，与正常初生重仔猪相比IUGR可显著降低ACC和M-CPT的活性（P＜0.05）;与NBW组相比，IUGR组仔猪ACC（P=0.083），M-CPT(P=0.069)以及SREBP1（P=0.090）的mRNA有降低的趋势。结论:7日龄时，IUGR仔猪肌肉组织中脂肪代谢和糖代谢活动均显著增强;在23日龄时，IUGR仔猪与NBW组相比肌肉组织脂肪代谢降低，可能是仔猪在幼年时期肌肉组织中以糖代谢分解供能为主，从而肌肉组织中脂肪代谢水平降低。
　　2.日粮胆碱水平对子宫内发育迟缓猪生长性能和肉品质的影响
　　从胎次相近、体型相似、正常分娩的12头窝仔猪中挑选正常初生重(NBW)和宫内发育迟缓（IUGR）的新生仔猪各1头，保证所选的每头IUGR均有对应NBW同胞仔猪，并随母猪哺乳至23 d断奶，23 d断奶后饲喂固体饲料，将NBW仔猪和IUGR仔猪随机分为四组，即N、N+C、I与I+C，每组4头。将仔猪饲养至200 d，屠宰后取胴体左侧背最长肌，测定肉品质，抗氧化指标的测定。结果表明:除200日龄外，IUGR猪各试验阶段体重期均显著低于NBW猪(P＜0.05);在200日龄，IUGR猪体重仍偏低(P=0.053)。与NBW组相比，IUGR猪可显著提高屠宰后1h和24h的pH值（P＜0.05），使肉色L*值、C*值显著升高（P＜0.05），H*值显著降低(P＜0.05)，与NBW相比，IUGR猪显著提高了肌肉组织中MDA含量（P＜0.05）;在73日龄，日粮胆碱有提高猪体重的趋势(P=0.095)，120日龄时，饲喂胆碱日粮组体重显著提高（P＜0.05）;日粮中添加胆碱组与正常组相比，可显著降低屠宰后1h的pH值(P＜0.05)，使肉色L*值和C*值显著升高(P＜0.05)，但对屠宰后24h和48h的滴水损失以及肉色H*值无显著影响（P＞0.05）;在添加胆碱后，MDA含量及清除O2·-能力均显著升高(P＜0.05)，但对清除2，2'-连氮基-双-(3-乙基苯并二氢噻唑啉-6-磺酸(ABTS·+)自由基和1，1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH·)自由基无显著影响（P＞0.05）。结论:IUGR猪生长缓慢，屠宰后肌肉pH值升高，且抗氧化能力降低;日粮中添加胆碱可显著提高IUGR猪生长性能，增强肉质感官效果，改善肉质。
　　3.日粮胆碱水平对子宫内发育迟缓猪肌肉组织糖代谢和脂肪代谢的影响
　　试验设计同试验2。当仔猪饲养至200日龄时，屠宰后去肌肉组织，测定其糖代谢和脂肪代谢酶活、关键酶的基因及调控因子mRNA表达量的变化。结果表明:(1)与正常组猪相比，IUGR猪肌糖原含量显著下降（P＜0.05），而肌肉中乳酸含量显著升高（P＜0.05），且IUGR猪糖酵解潜值(GP)显著升高（P＜0.05）;与正常组猪相比，IUGR猪有提高LDH含量的趋势（P=0.057），但对CK、SDH的酶活性变化不显著（P＞0.05）;与正常组猪相比，IUGR猪PEPCK以及G-6-Pase酶活性显著降低（P＜0.05），PKM2及PFKM mRNA的表达量显著提高（P＜0.05），GS mRNA表达量显著降低(P＜0.05)，GLUT4 mRNA表达量有降低的趋势（P=0.074）。日粮中添加胆碱后，肌肉中糖原含量有增加的趋势（P=0.051），乳酸含量（P=0.091）和GP值（P=0.074）有降低的趋势，CK含量显著升高（P＜0.05），但对LDH、SDH酶活性的影响不显著（P＞0.05）;另外，高水平胆碱对IUGR猪PEPCK以及G-6-Pase酶活性无显著影响（P＞0.05），GS和GLUT4 mRNA的表达量显著升高(P＜0.05)，PFKM mRNA表达量有下降的趋势(P=0.087)，PKM2 mRNA表达量无显著变化（P＞0.05）。(2)与NBW组相比，IUGR组猪TG及IMF含量显著升高(P＜0.05)，且IUGR可显著提高ACC酶的活性(P＜0.05)，显著降低M-CPT酶的活性(P＜0.05);另外，与NBW组相比，IUGR组猪FAS，ACC以及SREBP1的mRNA表达量均显著升高(P＜0.05)，而M-CPT的mRNA表达量有降低的趋势(P=0.061);在日龄中添加高水平胆碱后，TG含量显著降低(P＜0.05)，IMF含量有降低的趋势（P=0.082），且ACC酶的活性显著降低(P＜0.05)，但对M-CPT酶活性影响不显著（P＞0.05）。饲喂高胆碱日粮组猪FAS，ACC以及SREBP1的mRNA表达量均显著降低(P＜0.05)，而M-CPTmRNA表达量显著升高（P＜0.05）。结论:IUGR猪肌肉组织糖原合成能力加强，肌内脂肪含量增加，表现为糖原及脂肪合成相关酶活及mRNA表达量增加;日粮中添加高水平胆碱后，糖原含量和肌内脂肪含量降低，可见胆碱对促进肌肉组织糖原和脂肪分解有积极作用。

目录

声明

摘要

本文缩略词及中英文对照表

引言

第一篇 文献综述

1．子宫内发育迟缓对猪糖代谢的影响

1．1 子宫内发育迟缓对胰岛结构的影响

1．2 子宫内发育迟缓对糖代谢的影响及其机制的研究进展

2．子宫内发育迟缓对猪肌肉组织脂肪代谢的影响

2．1 肌内脂肪细胞的生长发育

2．2 肌内脂肪与肉品质

2．3 子宫内发育迟缓对肌内脂肪的影响及其机制的研究进展

3．胆碱的营养功能及其对糖脂代谢的调控作用

3．1 胆碱在体内的代谢

3．2 胆碱对动物体糖脂代谢的调控作用

参考文献

第二篇 试验研究

第一章 子宫内发育迟缓对哺乳仔猪肌肉糖脂代谢的影响

试验一 子宫内发育迟缓对哺乳仔猪肌肉糖代谢的影响

参考文献

试验二 子宫内发育迟缓对哺乳仔猪肌肉脂肪代谢的影响

参考文献

第二章 日粮中添加胆碱对宫内发育迟缓猪生长性能和肉品质的影响

1．材料和方法

2．结果与分析

3．讨论

4．结论

参考文献

第三章 日粮中添加胆碱对宫内发育迟缓猪肌肉糖脂代谢的影响

试验一 日粮中添加胆碱对子宫内发育迟缓猪肌肉糖代谢的影响

参考文献

试验二 日粮中添加胆碱对子宫内发育迟缓猪肌肉组织脂肪代谢的调控

参考文献

全文结论

致谢

攻读硕士学位期间发表论文