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小麦新型富脯氨酸蛋白编码基因TaPRP.1的功能分析

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摘要

第一章 文献综述

第一节 粒重相关基因的研究进展

一、已克隆的粒重相关基因

二、籽粒发育影响因素

第二节 富脯氨酸蛋白PRPs的研究进展

一、PRP基因的组织特异性表达

二、PRP基因对逆境胁迫的响应

第三节 转基因技术研究进展

一、基因枪转化法

二、农杆菌介导法

三、小麦遗传转化存在的问题

第二章 小麦新型富脯氨酸蛋白编码基因TaPRP.1 的功能分析

引言

1 材料与方法

1.1 植物材料与处理

1.2 总RNA的提取和反转录

1.3 表达载体的构建

1.4 小麦遗传转化

2 结果与分析

2.1 TaPRP.1 表达谱分析

2.2 转TaPRP.1 基因小麦的鉴定

2.3 TaPRP.1 在转基因植株中的表达检测

2.4 转基因植株的千粒重分析

3 讨论

全文总结

附录

参考文献

致谢

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摘要

千粒重是影响小麦产量的重要因素。发掘和克隆粒重相关基因对高产育种有重要的意义。本实验室前期研究中,通过3'RACE和RT-PCR的方法克隆了四个编码一类新型富含脯氨酸蛋白的基因TaPRPs,电子表达分析结果表明TaPRPs主要来源于花器官和开花后0小时到3天的种子文库中,这说明TaPRPs可能参与种子发育早期的生物学进程。
  在此研究基础之上,本研究通过转基因的方法获得TaPRP.1过量表达的转基因小麦,分析了其在种子发育进程中的作用以及对小麦产量性状的影响。在开花期小麦的根、茎、叶中检测不到TaPRP.1的表达,TaPRP.1在穗部表达丰度很低,而在开花后5天的种子中表达丰度达到最高,随后其表达丰度逐渐降低。利用基因枪转化技术将Actin启动子驱动的TaPRP.1表达载体导入受体材料B31697,获得4个TaPRP.1超量表达的转基因阳性植株。TaPRP.1超量表达显著提高了转基因植株的粒重。

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