温度对牙鲆有丝分裂雌核发育后代性别和生长发育的影响

摘要

牙鲆（Paralichthys olivaceus）是我国重要的海水养殖鱼类之一。由于牙鲆雌、雄鱼生长差异较大，人为诱导牙鲆雌核发育，实现全雌化养殖，对于提高养殖产量和经济效益意义重大。人工诱导有丝分裂雌核发育进而能够产生纯合的后代，即雌核发育双单倍体(Doubled-Haploid，DH)具有高度的纯合性，是珍贵的遗传学研究实验材料。
　　本实验利用人工诱导牙鲆有丝分裂雌核发育的方法，获得雌核发育双单倍体受精卵，孵化后，17℃水温下养殖10天左右。再平均分成三组，分别在20℃、24℃、28℃进行温度诱导，后精心饲养至100日龄，获得实验群体。染色观察该试验群体的性腺组织石蜡切片，进行表型性别鉴定并统计雌雄比例;测量试验群体的形态学性状，对生长性状（体质量、全长、体高）进行分析比较;运用联合异速生长尺度模型，对三个温度组DH牙鲆个体的多个生长性状差异进行统计比较。旨在为雌核发育双单倍体牙鲆性别决定和生长提供温度判别的重要依据，为未来应用双单倍体进行遗传育种研究工作、实现体重与体型的同步选育奠定理论基础。研究结果如下:
　　(1)在20℃的处理群体中，产生轻微的雄性化，雌雄鱼占该群体的比例分别为46.6和53.4％。随着温度的升高产生明显的雄性化，在24和28℃分别产生60.3和98.3％雄性比例。卡方检验表明，与在20℃饲养条件下相比，24和28℃饲养对雌核发育双单倍体牙鲆的雄性化效果有极显著差异(P＜0.01)。
　　(2)对三个温度梯度DH牙鲆的生长性状（体重、体高、全长）进行的正态分布处理显示:24℃组DH牙鲆体重、体高、全长均可认为近似于正态分布，20和28℃组DH牙鲆体重、体高均不可近似于正态分布。单因素方差分析显示:与20和28℃相比，24℃对雌核发育双单倍体牙鲆的体重、体高、全长均有着显著性影响。
　　(3)24℃组DH牙鲆雄性中，体重和形态学性状头长，尾柄高，尾柄长，体高，全长这6个性状与20℃组DH牙鲆雄性、28℃组DH牙鲆雄性间有显著差异。并且24℃组DH牙鲆雄性这些生长性状值均比另外两个温度高。与20和28℃的养殖温度相比，24℃DH牙鲆生长更快。
　　(4)运用联合异速生长尺度模型，统计比较三个温度组DH牙鲆群体的异速生长差异，结果显示:体高与体重、体长与体重、全长与体重间存在较高的异速生长关系，说明从相对生长速度来讲，体高、体长和全长略快。其中，体高和全长的异速生长指数最大值均出现于24℃组中，而体长异速生长指数的最大值出现于20℃组中;同时20℃组中雌鱼体高和全长的异速生长指数均高于雄鱼，而24℃组中雌鱼体高和体长的异速生长指数均高于雄鱼。

目录

声明

摘要

第一章 文献综述

1 鱼类育种中现代生物技术的应用

1．1 现代生物技术

1．2 鱼类雌核发育

1．3 双单倍体鱼类的应用

2 环境因素对鱼类性别决定及生长性状的影晌

2．1 遗传决定模式

2．2 环境决定模式

2．3 环境因素对鱼类生长性状的影响

3 异速生长

3．1 鱼类的生长

3．2 异速生长的概念

3．3 异速生长的模型

3．4 鱼类异速生长的研究

4 研究目的意义及技术路线

4．1 目的意义

4．2 技术路线

第二章 温度对牙鲆双单倍体性逆转的影响

1 材料和方法

1．1 实验材料

1．2 实验仪器

1．3 实验试剂及配制方法

1．4 实验方法

1．5 数据处理

2 结果与分析

2．1 雌核发育双单倍体牙鲆的性别鉴定

2．2 不同温度下牙鲆雌核发育双单倍体的性比

2．3 温度对牙鲆雌核发育双单倍体性逆转的影晌

3 讨论

4 小结

第三章 温度对牙鲆双单倍体生长性状的影响

1 材料和方法

1．1 实验材料

1．2 实验仪器

1．3 试验试剂

1．4 试验方法

1．5 数据处理

2 结果与分析

2．1 不同温度下牙鲆雌核发育双单倍体的生长

2．2 温度对牙鲆雌核发育双单倍体生长性状的影响

3 讨论

4 小结

第四章 温度对牙鲆双单倍体异速生长的影响

1 材料和方法

1．1 实验材料

1．2 联合静态异速生长指数模型

1．3 异速生长的统计比较

2 结果与分析

2．1 生长性状的描述性统计分析

2．2 形态学性状相对体重的异速生长分析

3 讨论

4 小结

全文总结

参考文献

致谢