硝苯地平对哮喘小鼠肺组织过氧化物酶体增殖物激活受体-γ和脂联素受体表达的影响

摘要

目的：通过复制急性哮喘小鼠模型，观察硝苯地平对小鼠肺组织过氧化物酶体增殖物激活受体-γ(PPAR-γ)和脂联素受体1，2(AdipoR1，AdipoR2)表达的影响；探讨硝苯地平抑制气道炎症的可能机制。
　　方法：24只雌性清洁级BABL/c小鼠随机分为4组(n=6)：生理盐水对照组(A组)、哮喘组(B组)、硝苯地平干预组(C组)、硝苯地平联合PPAR-γ抑制剂(GW9662)干预组(D组)。A组给予等量的Al(OH)3生理盐水致敏及生理盐水雾化激发；B、C、D组小鼠于第0、7、14d给予含[鸡卵白蛋白(OVA)25μg+Al(OH)31mg]的生理盐水0.2ml腹腔注射致敏，于第21～26d以2％的OVA生理盐水溶液雾化激发，每天1次，每次30min。在每次雾化前1h，C组给予硝苯地平(1.5mg/kg/d)0.2ml腹腔注射干预；D组先给予GW9662(1.0mg/kg/d)0.2ml腹腔注射，30min后给予硝苯地平(1.5mg/kg/d)0.2ml腹腔注射干预；A、B组腹腔注射生理盐水0.2ml作对照。收集左肺支气管肺泡灌洗液(BALF)，检测BALF中细胞计数及分类，HE染色后观察肺组织病理改变，实时荧光定量PCR和Westernblot法检测肺组织PPAR-γ和脂联素受体的表达情况。
　　结果：(1)各组BALF中白细胞总数、中性粒细胞数、嗜酸性粒细胞数及淋巴细胞数分别为：A组为(7.58±0.77)×105/ml、(0.63±0.06)×105/ml、(0.003±0.004)×105/ml、(0.70±0.03)×105/ml，B组为(17.39±0.62)×105/ml、(2.20±0.26)×105/ml、(1.41±0.08)×105/ml、(1.83±0.09)×105/ml，C组为(12.39±0.63)×105/ml、(1.44±0.19)×105/ml、(0.88±0.10)×105/ml、(1.40±0.10)×105/ml，D组为(16.58±1.06)×105/ml、(2.09±0.14)×105/ml、(1.41±0.07)×105/ml、(1.72±0.08)×105/ml。白细胞总数及分类计数B组较A组明显升高，差异有统计学意义(P<0.01)，C组较B组明显降低，差异有统计学意义(P<0.01)，D组较C组明显升高，差异有统计学意义(P<0.01)，D组与B组比较差异无统计学意义(P>0.05)。(2)A组小鼠支气管粘膜正常，管周无炎性细胞浸润，肺泡结构完整；B组小鼠气道粘膜充血水肿，气道周围可见大量的炎性细胞浸润，管腔狭窄；C组小鼠气道周围炎性改变较哮喘组减轻，气道周围少量炎性细胞浸润；D组小鼠气道粘膜充血水肿，气道周围可见较多的炎性细胞浸润，与哮喘组小鼠相似。(3)A组小鼠肺组织中有少量PPAR-γmRNA及蛋白、AdipoR1和AdipoR2 mRNA的表达；B组小鼠肺组织PPAR-γmRNA及蛋白表达较A组明显增加，AdipoR1和AdipoR2 mRNA表达较A组明显下降，差别有统计学意义(均P<0.01)；C组与B组比较，小鼠肺组织PPAR-γmRNA及蛋白、AdipoRl和AdipoR2 mRNA明显增加，差别有统计学意义(均P<0.01)；D组与C组比较，小鼠肺组织中几乎无PPAR-γ表达，AdipoR1和AdipoR2 mRNA表达水平明显减少，差别有统计学意义(均P<0.01)。
　　结论：硝苯地平可通过上调表达PPAR-γ，增加脂联素受体的表达，减少炎症细胞的浸润，抑制气道炎症反应。