人FL重组蛋白分离纯化工艺的建立及其在急性辐射损伤小鼠救治中的运用

摘要

本研究在已成功地克隆和高效表达人FL重组蛋白的工作基础上，展开了以下几方面的实验研究：建立rhFL的分离纯化工艺，获得足够量的、高纯度且具有生物学活性的重组FL蛋白；采用亚致死剂量6.0Gy60Coγ照射BALB/C小鼠造成急性辐射损伤，在辐射前、后用FL、G-CSF、EPO、IL-11等单独或联合进行救治，观察外周血细胞、骨髓细胞集落培养CFU-MIX计数及生存期的改变；同时做光镜切片，观察小鼠各脏器的形态学改变，从而分析这些细胞因子对急性辐射损伤小鼠骨髓造血功能的恢复，各脏器的辐射防护效应及生存期的改变，为临床放、化疗病人的治疗提供理论依据和实验参数；rhFL对造血系统恶性肿瘤细胞株细胞(Raji)的体外作用研究，为FL在临床中的应用提供有价值的资料。　　研究结果表明：采用全自动发酵装置，获得毕氏酵母高效表达rhFL，再经DEAE离子柱、凝胶过滤柱SUPERDEXtm-200prepgrade和FPLC分离系统进行分离纯化，最终获得较高纯度的重组蛋白，经Raji细胞对FL的增殖实验和造血细胞体外集落形成实验分析，证明所得的重组蛋白有良好的生物学活性；FL、G-CSF、EPO、IL-11单独或联合处理可明显增加受辐照小鼠的骨髓细胞、外周血WBC、PLT、RBC和CFU-MIX的数量，与对照组相比均有显著性差异。切片观察，重组FL对小鼠的肝、心、肺、肾有明显治疗作用，与对照组相比，能明显提高实验组小鼠的生存率，提示FL等细胞因子对受辐照小鼠的骨髓造血功能具有明显生物学效应，动物模型中获得的数据可作为临床运用的参照，同时也为肿瘤病人的放、化疗提供新的思路。

目录

论文说明：指导小组成员、英文缩写词

研究背景

第一部分FL的生物工程生产及其重组蛋白的分离纯化

前言

结果

讨论

参考文献

第二部分人重组FL在小鼠实验性辐射损伤救治中的作用

前言

材料和方法

一、细胞因子对辐射损伤小鼠造血功能的影响

二、细胞因子对辐射损伤小鼠各脏器的保护作用

三、细胞因子对各实验组小鼠生存率的影响1

三、细胞因子对各实验组小鼠生存率的影响2

三、细胞因子对各实验组小鼠生存率的影响3

讨论

参考文献

第三部分重组人FL对淋巴瘤和白血病株的体外生长作用

前言

材料和方法

结果

讨论

参考文献

展 望

三年学习期间发表和待发表的论文题目

致谢