沙利度胺对大鼠胶原诱导的关节炎滑膜组织缺氧诱导因子-1α表达的影响

摘要

类风湿关节炎(rheumatoid arthritis，RA)是以周围对称性的关节肿痛、关节破坏和血管翳形成为特征的慢性炎症性系统性自身免疫性疾病。滑膜血管翳是由增生的滑膜细胞和浸润的炎症细胞组成。RA的滑膜炎症组织是一个慢性缺氧的环境，而且缺氧被认为与RA的发病机制有关。缺氧诱导因子(HIF)是一个关键的调控氧稳态的转录因子，缺氧可以诱导它表达增加。新近大量研究表明HIF-1在RA滑膜组织细胞增殖、血管生成、抑制凋亡、糖酵解及铁代谢等方面起关键作用，提示抑制缺氧诱导因子的表达可能成为治疗象RA一样的慢性炎症性疾病的新策略。 本文以鸡II型胶原诱导的大鼠关节炎为模型探讨沙利度胺(Thaiidomide,Thd)对类风湿关节炎的治疗作用及其与滑膜缺氧诱导因子-1 a(HIF-1 a)的关系。 雌性SD大鼠，将其随机分为模型组和正常组，再将两组分别随机分为对照组、溶媒组和Thd治疗组。模型组用II型胶原诱导关节炎，Thd治疗组每天按600mg/kg的剂量灌胃；溶媒组以相同剂量的溶媒(10％DMSO)灌胃；每天观察大鼠一般情况及炎症大鼠的关节炎指数，16天后麻醉断头处死，评价疗效包括分析关节炎指数和腕或踝关节的病理变化，应用Western blot和免疫组织化学方法进一步分析膝关节滑膜组织的王HIF-1 a蛋白表达的变化。 研究主要发现：与模型组中的对照组比较，Thd治疗组在用药一周后症状明显改善，两周后病理变化有明显改善，关节炎指数明显降低；模型组滑膜组织HIF-1 a蛋白表达显著增强(P<0.05)，而Thd治疗组显著受到抑制(P<0.05)。根据本研究结果可以得出的主要结论：Thd能明显减轻类风湿关节炎的症状和病理变化，其作用机制可能与抑制滑膜组织HIF-1 a蛋白表达有关。

目录

文摘

英文文摘

论文说明：中英文对照表

声明

第一章引言

1.1缺氧及缺氧诱导因子在类风湿关节炎发病机制中的作用

1.1.1缺氧诱导因子的结构与功能

1.1.2 HIF-1在RA发病机制中的作用

1.2通过抑制滑膜组织HIF-1α表达治疗RA的假设

1.2.1滑膜细胞低氧的微环境及细胞转化特性与肿瘤的相似性

1.2.2沙利度胺可能通过抑制滑膜组织HIF-1α的表达发挥治疗作用

1.3沙利度胺与类风湿关节炎

1.3.1沙利度胺的免疫调节作用

1.3.2沙利度胺的抗炎作用

1.3.3沙利度胺的抗血管生成作用

1.3.4沙利度胺调节细胞黏附

1.3.5沙利度胺治疗类风湿关节炎的临床与实验研究

第二章大鼠胶原诱导的关节炎模型的制备

2.1实验对象

2.1.1实验动物及分组

2.2主要试剂及仪器设备

2.2.1主要试剂

2.2.2仪器设备

2.3实验方法

2.3.1造模方法

2.3.2标本采集与处理

2.3.3模型的观察与评价方法

2.4实验结果

2.5 讨论

2.6本章小结

第三章沙利度胺对大鼠胶原诱导的关节炎滑膜组织HIF-1α表达的影响

3.1实验对象及处理

3.1.1实验动物及分组

3.1.2模型复制

3.1.3药物配制及给药方法

3.1.4标本采集及处理

3.2主要试剂及仪器

3.2.1仪器设备

3.2.2主要试剂及配方

3.3实验项目和方法

3.3.1关节炎指数评分法

3.3.2滑膜病理学研究

3.3.3滑膜组织Western blot分析

3.3.4血红蛋白测定：

3.3.5抗Ⅱ型胶原抗体的测定：

3.3.6统计分析方法

3.4结果

3.4.1一般情况：

3.4.2病理观察

3.5讨论

3.6本章小结

第四章研究总结与展望

4.1研究总结

4.2研究结论

4.3研究展望

参考文献

本文创新之处

附录

致谢

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