5-Aza-CdR对肾细胞癌Caki-1细胞生长及E-cadherin基因甲基化的影响

摘要

目的:研究5-氮杂-2’-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)对人肾癌Caki-1细胞株增殖、凋亡的影响,进一步分析5-Aza-CdR处理对E-cadherin基因甲基化状态的影响,初步探讨肾癌发病机制及临床治疗的可行性。
　　 方法:(1)使用不同浓度(10-6、10-5、10-4mol／L)的特异性DNA甲基转移酶抑制剂(5-Aza-CdR)处理Caki-1肾癌细胞株；(2)四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色实验观察细胞经药物处理前后的生长活性；(3)甲基化特异性PCR(MSP)法检测肾癌细胞株经特异性DNA甲基转移酶抑制剂(5-Aza-CdR)处理前后E-cadherin基因的甲基化状态；(4)蛋白质印迹法(Western blot)检测5-Aza-CdR处理细胞前后E-cadherin蛋白的表达情况。
　　 结果:(1)MTT检测发现:特异性DNA甲基转移酶抑NN(5-Aza-CAR)可以明显抑制Caki-1肾癌细胞的增殖,而且与药物浓度及作用时间在一定范围内成正相关(p<0.05)；(2)甲基化特异性PCR(MSP)检测发现未经特异性DNA甲基转移酶抑制剂(5-Aza-CdR)处理组的基因高甲基化,经10-6mol／L5-Aza-CdR处理72小时后,E-cadherin基因启动子区域高甲基化得到逆转；(3)蛋白质印迹法(Western blot)显示经过药物处理72H的肾癌细胞株Caki-1较未经处理的对照组的E-cadherin蛋白表达增强.
　　 结论:5-Aza-CdR能够有效逆转肾细胞癌Caki-1细胞E-cadherin基因的异常甲基化,恢复E-cadherin蛋白表达,从而诱导肿瘤细胞凋亡,抑制肾癌细胞生长。

目录

文摘

英文文摘

前言

正文

材料与方法

1 主要仪器设备

2 主要试剂

3 试验方法

结果

讨论

结论

综述一 E-cadherin血在肾肿瘤中的研究进展

综述二 E-钙粘连素与泌尿系统肿瘤关系研究进展

参考文献

致谢

攻读硕士期间发表的论文

英文缩略词对照