PLGA和羧甲基壳聚糖载药超声微泡的制备及性能研究

摘要

超声微泡造影剂技术自发明以来，在临床诊断中发挥了巨大的作用，特别是在心血管疾病诊断领域，有着不可替代的作用。随着该技术的不断发展以及临床对其要求的不断增加，超声微泡造影剂已经由单纯的诊断造影功能向靶向定位载药造影剂方面转变，具有极大的应用潜力。PLGA、壳聚糖及其衍生物均是具有良好生物相容性和体内可降解性的无毒有机高分子聚合物，在组织工程和生物医药领域都得到了广泛的应用。多烯紫杉醇是以短叶紫杉或者红豆杉中提取分离的化学物质紫杉醇为基础进行侧链改造合成出来的一种新的抗肿瘤药物，在局部晚期非小细胞性肺癌和转移性乳腺癌的治疗中具有良好的效果。以此制备的载药超声微泡，是一种良好的药物运载系统，超声环境下可明显促进药物的释放，提高药物的利用度。
　　本研究以上述高分子聚合物材料为载体，以多烯紫杉醇为负载药物，制备不同的载药超声微泡制剂，并对其形态、载药效果、体外释放以及体外抗肿瘤效果等方面进行考察。论文主要包括以下三个方面的内容:
　　(1)以PLGA为膜材的超声微泡的制备
　　采用复乳化-溶剂挥发法制备PLGA超声微泡，并通过单因素实验优化制备工艺，选择最佳制备条件。实验中选择有机高分子材料的浓度、PVA浓度、初乳化以及复乳化时的两相比例等作为关键因素，考察上述因素的改变对最终样品制备结果所产生的影响。结果显示，当PLGA浓度为60 mg/mL、PVA浓度为3％、初乳化时有机相与内水相比例为5∶1以及复乳化时初乳液与外水相比例为1∶5时，制备的微泡形态良好，大小符合要求。
　　(2)载药PLGA超声微泡的制备及体外评价
　　以PLGA为膜材，以多烯紫杉醇为负载药物，参照优化后的制备条件，制备载药的PLGA超声微泡;通过高效液相色谱法(HPLC)对载药微泡中药物含量进行检测;通过模拟不同的超声环境，考察超声功率和时间对释放结果的影响，研究其体外超声促释放效果。结果显示，载药微泡样品粒度均匀，粒径为2～6μm，表面光泽度好且可见清晰气体孔道;该制剂的载药量和包封率分别达到2.36％和61.4％;模拟超声促释放实验中，声强大于2.0W/cm2或者超声时间超过20s，药物释放率均可达到90％以上。综上所述，PLGA载药微泡稳定有效，超声条件下药物释放能力明显增强，有较大的应用潜力。
　　(3)载药羧甲基壳聚糖超声微泡的制备和相关性能研究
　　以羧甲基壳聚糖为载体材料，以多烯紫杉醇为负载药物，制备载药超声微泡样品;模拟不同超声环境，测定药物的释放结果，考察其超声促释放效果;利用7721肝癌细胞，考察载药微泡的体外抗肿瘤能力。结果显示，载药羧甲基壳聚糖超声微泡粒度均一、表面光泽，载药量和包封率分别约为5％和70％;样品在超声环境下释放率超过90％，相对于传统释放模式提高了近一倍;载药样品在超声环境下对肿瘤细胞的杀伤效果明显优予未超声处理样品。综上所述，羧甲基壳聚糖载药微泡具有良好的载药及超声释药能力，体外抗肿瘤效果明显，具有较高的应用价值。

目录

声明

摘要

第一章 绪论

1．1 药物载体系统的简介

1．2 超声微泡及其临床应用概述

1．3 超声微泡制备技术的发展

1．4 超声微泡载体系统材料及气体的简介

1．4．1 载体材料的分类及简介

1．4．2 超声微泡的气体材料简介

1．5 高分子材料PIGA简介

1．6 多烯紫杉醇的简介

1．7 壳聚糖及其改性衍生物的简介

1．8 超声微泡造影剂在临床中的应用

1．8．1 超声徽泡造影剂在诊断中的应用

1．8．2 超声微泡在疾病治疗中的应用

1．9 课题的研究背景、目的与研究内容

第二章 以PLGA为膜材的超声微泡的制备

2．1 前言

2．2 实验方法

2．2．1 仪器设备与试剂材料

2．2．2 微泡的制备

2．2．3 制备工艺优化实验

2．2．4 优化后制备超声微泡

2．2．5 优化制备后的初步形态观察

2．3 实验结果与讨论

2．3．1 一般制备后微泡样品的观察

2．3．2 各因素水平考察的结果

2．3．3 优化制备条件下制备的超声微泡的形态考察

2．4 本章总结

第三章 载药PLGA超声微泡的制备及体外评价

3．1 前言

3．2 实验方法

3．2．1 仪器设备与试剂材科

3．2．2 载药微泡的制备

3．2．3 HPLC法考察样品的载药能力

3．2．4 载药超声微泡的基本形态观察

3．2．5 不同超声环境下药物体外释放研究

3．3 实验结果与讨论

3．3．1 样品外观观察

3．3．2 样品载药能力考察结果

3．3．3 载药超声微泡样品的基本形态考察结果

3．3．4 不同超声环境下药物释放结果

3．4 本章总结

第四章 载药羧甲基壳聚糖超声微泡的制备及相关性能研究

4．1 前言

4．2 实验方法

4．2．1 仪器设备与试剂材料

4．2．2 羧甲基壳聚糖超声微泡的制备及观察

4．2．3 载药样品的药物含量测定及体外释放效果测定

4．2．4 载药徽泡的体外细胞实验

4．3 实验结果与讨论

4．3．1 羧甲基壳聚糖徽泡的一般理化性质

4．3．2 药物含量检测结果

4．3．3 载药超声微泡样品的基本形态考察结果

4．3．4 不同超声环境下药物释放结果

4．3．5 载药超声微泡的体外细胞实验结果

4．4 本章总结

第五章 全文总结与展望

参考文献

致谢

硕士在读期间所发表的论文