过氧亚硝基阴离子在脓毒症心肌细胞促炎症转变中的作用

摘要

目的：探讨过氧亚硝基阴离子（Peroxynitrite，ONOO-）在脓毒症（Sepsis）心肌细胞转变为促炎症状态中的作用。
　　方法：动物研究实验中取12只SD大鼠（3~4月龄，200~250g，雌雄不拘），随机分为3组（n=4）。以3mg/g的剂量向大鼠腹腔注射大鼠盲肠内容物（180mg/ml）诱导大鼠腹膜炎（Feces Induced Peritonitis，FIP）作为脓毒症大鼠模型作为FIP组；对照组大鼠注射同等体积的生理盐水；接受过氧亚硝基阴离子的分解剂（Fe-TPPS，10mg/kg，ip）预处理1h后再经腹腔注射相应剂量的盲肠内容物作为Fe-TPPS+FIP组。6小时后取各组大鼠心室游离壁制作病理切片，并在Olympus显微镜下观察心肌间质中心粒细胞浸润程度；同时取各组心尖组织采用ELISA技术检测心肌组织髓过氧化物酶（Myeloperoxidase，MPO）的活性；并收集对照组、FIP组大鼠血浆用于刺激心肌细胞。细胞研究实验中采用健康的SD乳鼠（日龄1~3d，雌雄不拘）心脏分离培养心肌细胞，分别经对照组、FIP组大鼠血浆刺激心肌细胞，使用ELISA、RT-PCR技术检测心肌细胞内ONOO-生成的标志物硝基酪氨酸（3-Nitrotyrosine，3-NT）、脂多糖诱导趋化因子（LPS-induced CXC Chemkine，LIX）及角质细胞起源趋化因子（Keratinocyte-derived Chemkine，KC）的表达情况。
　　结果：脓毒症大鼠心肌组织较对照组MPO活性升高，且心肌组织间隙炎症细胞浸润增加；脓毒症血浆刺激心肌细胞导致其ONOO-产生增加,心肌细胞转变为促炎症状态，趋化因子LIX、KC表达增加；用过氧亚硝基阴离子分解剂（Fe-TPPS，5,10,15,20-四磺酸基苯基-铁卟啉）预处理后，心肌组织较FIP组MPO活性显著降低、心肌组织间隙炎症细胞浸润减轻；心肌细胞内ONOO-减少，趋化因子LIX、KC表达降低。
　　结论：过氧亚硝基阴离子在脓毒症心肌细胞炎症反应中起重要作用。