黄精中甾体皂苷的分离和结构鉴定

摘要

黄精(PolygonatumsibiricumRedoute)系百合科(Liliaceae)黄精属多年生草本植物，为卫生部认可的药食两用资源，具有降血脂、抗肿瘤和抗菌等临床功效。为了黄精的进一步开发和利用，我们对黄精的主要活性成份甾体皂苷的化学组成作了系统的研究，并初步探讨了黄精总皂苷和分离所得的主要化合物对高血脂小鼠的降血脂功效。主要研究内容如下： 1.称取25kg黄精，粉碎过20目，按1:7(kg·L-1)料液比，用体积分数70％的乙醇回流提取3次，每次2h。将提取液过滤后，减压蒸馏至无乙醇得黄精乙醇提取物。将乙醇提取物用石油醚萃取脱脂，直至石油醚层无色。将脱脂后的物质用正丁醇萃取多次，直到正丁醇相无色。合并正丁醇相，蒸发至无正丁醇，即得正丁醇提取物。 将黄精的正丁醇提取物用大孔树脂分离，用水、20％、40％、50％、75％和95％乙醇洗脱。流出液用薄层色谱法进行检测，根据显色、Rf和保留时间不同，分成A、B、C、D、E、F、G、H、I九部分。将主要含甾体皂苷的部分G、H和I部分用聚酰胺分离，除去荧光物质，得主要含皂苷的部分2。聚酰胺流出物含皂苷的2部分用ODS进一步分离，得2-1、2-2、2-3段。将各段分别用ODS和MCI柱色谱进行分离、纯化，最终从黄精的正丁醇提取物中分离出了四个化合物。 2.运用1H-NMR、13C-NMR、135DEPT-NMR技术对四个化合物的结构进行鉴定，对结果进行分析后得四个化合物分别是： 薯蓣皂苷元-3-O-β-D-吡喃葡萄糖基(1→3)-β-D-吡喃葡萄糖基(1→4)-[α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)]-β-D-吡喃葡萄糖苷薯蓣皂苷元-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)-[α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)]-β-D-吡喃葡萄糖苷薯蓣皂苷元-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)-[β-D-吡喃葡萄糖基(1→4)]-β-D-吡喃葡萄糖苷和薯蓣皂苷元其中皂苷I和III在黄精中未见报道。 3.通过高血脂症小鼠模型对黄精总皂苷和主要化合物II的降血脂功效进行了初步的研究，分析小鼠的总胆固醇(TC)和甘油三脂(TG)后发现：黄精总皂苷对小鼠TC和TG无显著影响，但化合物II能显著降低高血脂小鼠的TC和TG(p<0.05)。

目录

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第一章绪论

1.1黄精概况

1.1.1黄精植物形态

1.1.2中药黄精加工和分类

1.1.3黄精药用和食用的历史

1.1.4黄精的生物活性

1.1.5黄精的临床应用

1.1.6黄精的开发和利用

1.2黄精属甾体皂苷

1.2.1甾体皂苷概述

1.2.2黄精属甾体皂苷的研究现状

1.3皂苷提取分离方法

1.3.1提取方法

1.3.2除杂方法

1.3.3分离方法

1.4立题背景和意义

1.5主要研究内容

第二章黄精中甾体皂苷的提取与分离

2.1前言

2.2材料与仪器

2.3实验方法

2.3.1黄精正丁醇提取物的制备方法

2.3.2大孔树脂柱的预处理

2.3.3大孔吸附树脂粗分

2.3.4流出液的检测

2.3.5聚酰胺分离

2.3.6 ODS柱色谱分离

2.3.7 MCI柱色谱分离

2.4结果与分析

2.4.1大孔树脂粗分

2.4.2聚酰胺分离

2.4.3 ODS进一步分离

2.4.4化合物Ⅰ分离

2.4.5化合物Ⅱ分离

2.4.6化合物Ⅲ和Ⅳ分离

2.4.7化合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ的纯度鉴定

2.4.8化合物Ⅰ-Ⅳ的分离流程

2.5本章小结

第三章黄精单体化合物的结构鉴定

3.1前言

3.2材料与仪器

3.3实验方法

3.4结果与分析

3.4.1化合物Ⅰ的结构解析

3.4.2化合物Ⅱ的结构解析

3.4.3化合物Ⅲ的结构解析

3.4.4化合物Ⅳ的结构解析

3.5本章小结

第四章黄精总皂苷和化合物Ⅱ降血脂活性的初步研究

4.1前言

4.2材料与仪器

4.3实验方法

4.3.1黄精总皂苷和化合物Ⅱ的制备方法

4.3.2基础饲料的构成和TritonWR-1339溶液的配制

4.3.3高血脂小鼠模型的建立

4.3.4总皂苷和化合物Ⅱ溶液的配制

4.3.5各组小鼠给药量

4.3.6小鼠血清TC和TG相关指标检测方法

4.3.7数据处理

4.4结果与分析

4.5本章小结

主要结论

问题与展望

致谢

参考文献

附录