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抗氧化低聚糖对肠道氧化还原状态与菌群的影响

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1 引言

1.1肠道菌群

1.2低聚糖与肠道菌群

1.3高脂膳食与肠道菌群

1.3.1高脂膳食与氧化应激

1.3.2高脂膳食与肠道菌群

1.4氧化还原状态与肠道菌群

1.4.1氧化还原状态与大肠杆菌、乳酸菌

1.4.2低聚糖的抗氧化作用

1.4.3硫辛酸的抗氧化作用

1.5研究意义及主要内容

2 实验材料与方法

2.1实验材料

2.1.1药品及试剂

2.1.2培养基

2.1.3主要仪器

2.2实验方法

2.2.1三种低聚糖对肠道微生物体外发酵的影响

2.2.2葡-半乳低聚糖和硫辛酸在体外氧化应激状态下对肠道微生物发酵的影响

2.2.3葡-半乳低聚糖和硫辛酸对高脂日粮小鼠肠道微生物菌群的影响

2.2.4多重PCR方法鉴定肠道三种乳杆菌

2.2.5数据处理与统计分析

3 结果与讨论

3.1三种低聚糖对肠道微生物体外发酵的影响

3.1.1低聚糖对小鼠肠道菌群体外发酵时乳杆菌数量的影响

3.1.2低聚糖对小鼠肠道菌群体外发酵时大肠杆菌数量的影响

3.1.3低聚糖对小鼠肠道菌群体外发酵时pH值的影响

3.1.4低聚糖对小鼠肠道菌群体外发酵时乳酸含量的影响

3.1.5低聚糖对小鼠肠道菌群体外发酵时糖含量的变化

3.2葡-半乳低聚糖和硫辛酸在体外氧化应激状态下对肠道微生物发酵影响

3.2.1 H2O2浓度的确定

3.2.2葡-半乳低聚糖和LA对发酵液中乳杆菌数量的影响

3.2.3葡-半乳低聚糖和LA对发酵液中大肠杆菌数量的影响

3.2.4葡-半乳低聚糖和LA对发酵液中pH值的影响

3.2.5葡-半乳低聚糖和LA对发酵液中乳酸含量的影响

3.2.6葡-半乳低聚糖和LA对发酵液中糖含量的影响

3.3葡-半乳低聚糖和LA对高脂日粮小鼠机体ROS水平、抗氧化能力和肠道菌群的影响

3.3.1葡-半乳低聚糖和LA对高脂日粮小鼠血脂的影响

3.3.2葡-半乳低聚糖和LA对高脂日粮小鼠全血和肠道ROS水平的影响

3.3.3葡-半乳低聚糖和LA对高脂日粮小鼠肠道菌群的影响

3.3.4葡-半乳低聚糖和LA对高脂日粮小鼠血浆和肠道抗氧化能力的影响

3.3.5葡-半乳低聚糖和LA对高脂日粮小鼠脾脏及肠道派伊尔结内毒素的测定

3.3.6小鼠肠道抗氧化能力与肠道乳杆菌和大肠杆菌含量的相关性分析

3.3.7小鼠PP内毒素与肠道乳杆菌和大肠杆菌含量的相关性分析

3.4.多重PCR鉴定氧化应激状态下低聚糖和LA对肠道三种乳杆菌的影响

论文主要结论

展望

致谢

参考文献

附录 作者在攻读硕士学位期间发表的论文

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摘要

目的:研究硫辛酸与低聚糖对机体氧化还原状态与肠道菌群平衡的关系,为深入认识肠道氧化还原状态对营养性氧化应激和肠道菌群调节作用提供基础数据。
   方法:1、利用小鼠肠道全菌群体外发酵研究硫辛酸(Lipoic acid,LA)和三种不同低聚糖对小鼠肠道菌群的影响;在小鼠肠道全菌群发酵液中,加入H2O2建立体外氧化应激模型,研究葡-半乳低聚糖和LA在氧化应激状态下状态对小鼠肠道菌群的影响。2、通过建立高脂饲粮诱导小鼠氧化应激模型,研究了葡-半乳低聚糖和LA对机体抗氧化能力和肠道乳酸菌和大肠杆菌的影响。3、运用多重PCR的方法,研究了葡-半乳低聚糖和LA对高脂膳食小鼠肠道三种乳杆菌含量的影响。
   结果:1.在小鼠肠道全菌群体外发酵实验中葡低聚糖、葡-半乳低聚糖、低聚蔗果糖均能增殖乳杆菌,提高乳酸产量;在H2O2造成的体外氧化应激模型中,葡-半乳低聚糖和LA均能改善发酵液中氧化还原状态,使肠道菌群恢复正常状态。2.长期饲喂(六周)高脂日粮导致小鼠机体氧化应激,全血、组织自由基ROS显著升高,抗氧化能力显著降低(P<0.05),肠道菌群紊乱,肠道屏障功能降低。葡-半乳低聚糖与硫辛酸均显著改善高脂日粮造成的氧化损伤,提高机体抗氧化能力,使血脂恢复到正常水平;提高肠道乳酸菌数量,保护肠道屏障;肠道乳杆菌含量与肠组织总抗氧化能力存在显著的正相关(P<0.05)、而与ROS、MDA水平呈显著地负相关(P<0.05)。3.LA和葡-半乳低聚糖的添加均能增加小鼠肠道内嗜酸乳杆菌和罗伊乳杆菌的含量,葡-半乳低聚糖的效果优于LA。
   结论:葡-半乳低聚糖和硫辛酸可以提高机体抗氧化能力发挥调整肠道菌群的功能。氧化还原状态与肠道大肠杆菌、乳杆菌的含量高度相关。

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