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新生大鼠缺氧缺血性脑损伤后海马齿状回神经发生与bFGF相关性的研究

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前言

第一章文献综述 新生大鼠缺氧缺血性脑损伤后海马神经发生机制的研究进展

第二章材料与方法

第三章结果

第四章讨论

1实验模型的选择

2 BrdU标记物选择

3海马与神经发生

4 bFGF与HIBD

5问题与展望

结论

参考文献

致谢

作者简介

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摘要

目的:观察新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(hypoxic-ischemic brain damage,HIBD)后海马齿状回BrdU阳性细胞的表达变化以及内源性bFGF的表达,并通过外源性bFGF干预进行对比,探讨新生大鼠缺氧缺血脑损伤后bFGF可能参与海马齿状回神经发生的机制。 方法: 1、新生7日龄S-D大鼠建立HIBD模型; 2、分组:免疫组织化学-假手术组、单纯缺氧组、单纯缺血组、缺氧缺血组、碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)组、生理盐水组;逆转录聚合酶链式反应(reverse transcription and polymerization chain reaction,RT-PCR)假手术组、单纯缺氧组、单纯缺血组、缺氧缺血组; 3、组织病理学检查观察HIBD后脑细胞凋亡与坏死情况; 4、免疫组织化学观察各组不同时间点海马区BrdU~H性细胞的表达; 5、RT-PCR检测内源性bFGF mRNA表达。 结果:免疫组化组:单纯缺氧后7d、14d较3d时升高了约82.7%、46.2%,分别与3d、21d比较差异有显著性(P<0.05),缺氧后7d与假手术组比较差异有显著性(P<0.05);单纯缺血后7d、14d较3d时升高了约104.5%、61.6%,分别与3d、21d比较差异有显著性(P<0.05),缺血后7d与假手术组比较差异有显著性(P<0.05);缺氧缺血组于HIBD后7d、14d较3d时升高了约117%、95.4%(P<0.05),21d下降至3d时的水平;bFGF组各时间点BrdU阳性细胞数与缺氧缺血组比较,分别增加约12.2%、14.1%、11.2%、15.2%(P<0.05)。RT-PCR组:单纯缺氧组bFGF mRNA表达7d、14d较3d时增加了约69.6%、34.2%,分别与3d、21d比较差异有显著性(P<0.05),7d时与假手术组比较差异有显著性(P<0.05);单纯缺血组bFGF mRNA表达7d、14d较3d时增加了约108.1%、41.3%分别与3d、21d比较差异有显著性(P<0.05),7d时与假手术组比较差异有显著性(P<0.05):缺氧缺血组bFGF mRNA于HIBD后7d、14d达到高峰,与3d时比较升高约108.9%、98.9%(P<0.05),21d时下降。 结论: 1、新生大鼠缺氧缺血性脑损伤后海马齿状回存在神经发生现象; 2、HIBD后2周内是神经发生的高峰期; 3、HIBD后2周内海马内源性bFGF mRNA呈高表达; 4、外源性bFGF干预有促进神经发生的现象存在。

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