二噁英在子宫内膜异位症发展中作用

摘要

目的：探讨二噁英（TCDD）在子宫内膜异位症发展中作用及可能的作用机制，为该病的病因病机研究提供新的突破口。 方法： 1、动物实验方法：①采用小鼠自体子宫内膜移植法建立小鼠子宫内膜异位症模型，分别给予（0、1、3、10）μg/TCDD剂量灌胃，每隔21天1次，于建模术后3、6、9周处死，鉴定异位病灶的形成，测量异位病灶面积，称量体重，摘取胸腺并称重，计算脏器系数。②采用半定量逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）和免疫组化检测染毒组和对照组小鼠模型子宫内膜异位症的异位病灶中AhR．、CYP1A1表达、RT-PCR法检测模型子宫内膜异位病灶中IL-1β表达。 2、临床研究方法：RT-PCR和免疫组化法检测人EMT患者异位内膜、在位内膜及正常子宫内膜中AhR、CYP1A1表达、RT-PCR法检测人不同子宫内膜中IL-1β表达。 结果： 1.小鼠自体子宫内膜移植法可成功建立小鼠子宫内膜异位症模型，对照组和染毒组建模成功率经比较，差异无统计学意义。 2.染毒组小鼠子宫内膜异位病灶面积明显增加，和对照组相比，有统计学差异，异位病灶面积增加和TCDD染毒具有明显时一效和量一效关系。 3.染毒组小鼠胸腺脏器系数降低，和对照组相比，有统计学差异，胸腺脏器系数降低和TCDD染毒具有明显时-效和量-效关系。 4.异位病灶面积增加和胸腺脏器系数减少之间有明显的相关性。 5.AhR蛋白及mRNA在染毒组小鼠子宫内膜异位病灶中表达增加，和对照组相比，差异有统计学意义，其表达水平和TCDD染毒具有明显量-效和时-效关系。 4.CYP1A1蛋白和mRNA在染毒组小鼠子宫内膜异位病灶中表达，其表达水平和TCDD染毒具有明显量-效关系，无时-效关系，对照组小鼠子宫内膜异位病灶中未检测到CYP1A1蛋白和mRNA表达。 6..IL-1β mRNA在染毒组小鼠子宫内膜异位病灶中表达增加，和对照组相比，有统计学差异，其表达水平和TCDD染毒具有量-效和时-效关系。 7.EMT异位内膜组、在位内膜组和正常内膜组中均有AhR蛋白及mRNA表达，异位内膜组中AhR蛋白及mRNA表达明显增加，和在位内膜组及正常内膜组比较，有统计学差异，AhR在月经周期不同时相的表达水平无统计学差异。轻度（Ⅰ、Ⅱ期）和重度（Ⅲ、Ⅳ期）EMT比较，EMT异位内膜组中AhR的表达水平无统计学差异。 8.EMT异位内膜组和在位内膜组均有CYP1A1蛋白及mRNA的表达，两组比较，无统计学差异，CYP1A1在月经周期不同时相的表达水平无统计学差异。轻度（Ⅰ、Ⅱ期）和蘑度（Ⅲ、Ⅳ期）EMT比较，EMT异位内膜组中CYP1A1的表达水平无统计学差异，正常子宫内膜组未检测到CYP1A1蛋白和mRNA表达。 9.EMT异位内膜组中IL-1β mRNA表达明显高于在位内膜组和正常内膜组，差异有统计学意义，IL-1β在月经周期不同时相的表达水平无统计学差异。轻度（Ⅰ、Ⅱ期）和重度（Ⅲ、Ⅳ期）EMT比较，EMT异位内膜组中IL-1β的表达水平无统计学差异。 结论： 1、自体子宫内膜移植术可成功建立子宫内膜异位症小鼠模型，方法简单，建模成功率高。 2、四氯二苯并二噁英（TCDD）染毒促进子宫内膜异位症小鼠模型异位病灶发展，且有时效和量效关系。 3、TCDD染毒导致免疫器官胸腺重量减轻，其对免疫系统的损害可能在EMT发生发展中起重要作用。 4、TCDD促EMT发展的分子机制之一可能是通过AhR途径激活，改变AhR及AhR反应基因IL-1β的表达。 5、CYP1A1可作为TCDD暴露，AhR激活的生化指标。

目录

文摘

英文文摘

论文说明：缩略词注释表

声明

绪论

第一章 文献综述

第二章 材料与方法

第一部分 动物实验

1 实验动物

2 试剂

3 实验方法

第二部分 临床研究

1 临床病例标本

2 试剂

3 实验方法

三 主要仪器与材料

四 统计方法

第三章 实验结果

1 一般情况

2 TCDD对小鼠子宫内膜异位病灶形成的影响

3 TCDD对小鼠子宫内膜异位病灶的促进作用

4 TCDD对小鼠胸腺脏器系数的影响

5 TCDD染毒剂量、胸腺脏器指数、异位病灶面积三者的相关性分析

6 免疫组化监测AhR、CYP1A1蛋白在小鼠子宫内膜异位病灶中表达

7 RT-PCR测定AhRmRNA、CYP1A1mRNA和IL-1βmRNA在小鼠子宫内膜异位病灶中表达

8 人免疫组化结果

9 人RT-PCR半定量结果

第四章 讨论

1 动物子宫内膜异位症模型和染毒模型建立

2 二噁英对子宫内膜异位症的影响

3 免疫因素在子宫内膜异位症发病中的作用

4 二噁英促子宫内膜异位症发展的分子机制

5 问题和展望

第五章 结论

致谢

参考文献

作者简介及在校期间发表论文