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宫内暴露壬基酚对小鼠卵巢发育影响的研究

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论文说明:缩略词

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前言

第一章材料与方法

1.1实验动物

1.2主要药品和试剂

1.3主要仪器

1.4主要溶液配制

1.5实验方法

1.5.1实验技术路线

1.5.2雌鼠分组及孕鼠获取方法

1.5.3孕鼠给药方法

1.5.4孕鼠分娩、仔鼠出生及生长情况观察

1.5.5两周龄仔鼠卵泡计数

1.5.6青春期雌性仔鼠动情起始及动情周期观察

1.5.7性成熟期(11-13周龄)雌性仔鼠各项指标检测

1.5.8性成熟期(13周龄)雌性仔鼠卵子非整倍性观察

1.5.9部分仔鼠生长卵泡电镜观察

1.6统计学处理

第二章结果

2.1怀孕母鼠孕期观察及F1代出生情况

2.2壬基酚对动情起始及动情周期的影响

2.3卵巢组织形态学观察

2.4性成熟期F1代雌鼠动情前期血清E2、FSH及抑制素B水平

2.5性成熟期F1代雌鼠配子非整倍率

2.6 F1代动物体重差异

第三章讨论

3.1宫内暴露壬基酚对雌性子代动情起始及动情周期的影响

3.2宫内暴露壬基酚对雌性子代卵巢的影响

3.3宫内暴露壬基酚对雌性子代体重的影响

3.4研究前景:不足和进一步的工作

结论

致 谢

参考文献

文献综述

作者简介

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摘要

目的:观察壬基酚宫内暴露对子代昆明小鼠卵巢发育的影响。
   方法:(1)雌性昆明小鼠受孕后7-17天,低、中、高剂量染毒组分别给予壬基酚(1.2mg、12mg、120mg·kg-1·d-1),对照组等量花生油灌胃。(2)子代小鼠出生后2周时取卵巢组织病理学检查,计数各级卵泡。(3)子代小鼠出生后3周起观察阴道开口时间,开口后每日阴道涂片观察阴道角化细胞及规律动情周期出现时间、动情周期模式;子代小鼠出生后11周起,再次阴道涂片约2周观察动情周期模式。(4)13周龄左右成年子代雌鼠于动情前期取血,放射免疫法测定血清促卵泡素、雌激素浓度,酶联免疫吸附法测定血清抑制素B浓度;取血后处死,取卵巢作组织病理学检查,各级卵泡计数。(5)以13周龄的子代雌鼠作为供卵者,行超促排卵,收集卵子,制备染色体标本,观察比较染毒组和对照组之间卵子非整倍体率的差异。
   结果:(1)与对照组相比,壬基酚低剂量组子代雌鼠阴道开口及阴道角化细胞出现时间提前(P<O.05);低、中剂量组规律动情周期出现时间提前并可见动情周期延长(P<O.05)。(2)与对照组相比,壬基酚高剂量组性成熟期卵巢始基卵泡数目减少(P<O.05),血清抑制素B水平降低(P<0.05)。(3)各染毒组动情前期血清雌激素水平降低(P<O.05),促卵泡素水平无明显差异。(4)壬基酚中剂量组与对照组相比,子代雌鼠卵子非整倍率有增加趋势,但差异无统计学意义(P>O.05)。(5)染毒组子代雌鼠体重较对照组明显升高(P<0.05)。
   结论:宫内暴露壬基酚,在较低剂量时可导致F1代雌鼠动情起始提前及动情周期不可逆性的变化;在较高剂量时可降低F1代雌鼠卵巢储备功能,并可影响其成年后动情前期血清雌激素水平。宫内暴露壬基酚并不引起F1代雌鼠成年后配子非整倍率明显升高。宫内暴露壬基酚可能导致F1代雌鼠卵母细胞超微结构的变化。

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