泪糖浓度的测定及其与血糖相关性的研究

摘要

[目的]比较正常人和糖尿病患者血糖浓度和泪糖浓度的相关性，探讨监测泪糖浓度成为一种无创的、实时反映糖尿病患者血糖控制情况的指标的可能，为此领域的深入研究和相关泪糖监测产品的研发提供理论依据。
　　 [方法]包括两个部分：第一部分的研究主要是探索并确定用于测定泪糖浓度的灵敏度好、准确度高的高效液相色谱质谱联用（HPLC-MS）检测方法，包括色谱柱的选择、仪器参数设置和流动相各组份比例调整、样本的前期处理等；第二部分的研究主要是无创性的泪液样本的采集和泪糖浓度的测定，包括在测量正常对照组和糖尿病组受检者清晨空腹血糖（FPG）后，立即使用微量采血管收集受检者非刺激性泪液样本并应用第一部分研究所确定的HPLC-MS方法测定泪糖值，其中正常对照组28例共28只眼，男15例，女13例，平均年龄58.04±13.71岁；糖尿病组75例共85只眼，男35例，女40例，平均年龄66.80±9.37岁，其中10例收集双眼泪液样本（先采集右眼泪液后立即采集左眼泪液）。采用凇验及方差分析比较两组间泪糖值，采用Pearson检验并计算相关系数R分析组内泪糖值及血糖值相关性，并比较先后采集糖尿病患者双眼泪液对泪糖浓度的影响。
　　 [结果]1、HPLC-MS重现性实验得相对标准偏差（RSD）为1.0％；定量限实验得仪器所能检测到的泪液样本中的葡萄糖的最低浓度为5ug·ml-1；回收率实验得100ug·ml-1、120ug·ml-1和150ug·ml-1三种浓度的D-葡萄糖标准工作贮备液的回收率平均值分别为99.97％、96.30％及95.30％，RSD为2.88％；2、正常对照组血糖值为4.90±0.44mmol·L-1（3.9-5.5mmol·L-1），泪糖值为0.081±0.027mm0l·L-1（0.040-0.150mmol·L-1），正常对照组28只眼样本中泪糖值和血糖值无直线相关（R=0.229，P>0.05）；糖尿病组血糖值为8.76±2.11mmol·L-1（5.9-15.7 mmol·L-1），泪糖值为0.460±0.204mmol·L-1（0.166-1.136mmol·L-1），糖尿病组75只眼样本泪.糖值和血糖值呈直线正相关（R=0.870，P<0.01），其中6例清晨FPG低于糖尿病诊断标准（≥7.0mmol·L-1）的受检者血糖范围为5.9-6.7mmol·L-1，泪糖均值为0.190±0.024mmol·L-1（0.166-0.234mmol·L-1），明显高于正常对照组泪糖值（t=-9.708，P<0.01）；3.、糖尿病组泪糖值较正常对照组泪糖值明显升高，差异显著（t=-15.736.P<0.01），有统计学意义；4、比较10例糖尿病组受检者个体间双眼泪糖值，除1例二者结果相近、2例左眼较右眼（先采集泪液眼）明显降低外，其余7例左眼泪糖值均较右眼升高，平均升高57.63±27.59％。
　　 [结论]1、本实验采用的HPLC-MS检测方法（包括仪器配置、色谱质谱条件）对泪糖的测定具有较好的精确度和灵敏度；2、在糖尿病患者中，泪糖浓度可以作为一个反映血糖浓度的良好指标；3、清晨FPG低于糖尿病诊断标准的糖尿病组受检者其泪糖浓度仍然明显高于正常人，推测血糖长期升高，可能造成眼部结膜、角膜和泪腺等结构对泪糖的调节失代偿。

目录

文摘

英文文摘

缩略词表

前言

文献综述

第一章 材料与方法

1.1 实验方法的选择和确定

1.2 实验材料

1.3 实验方法

第二章 实验结果

2.1 HPIC-MS方法学验证

2.2 泪液葡萄糖含量测定

2.3 泪液葡萄糖浓度测得及其与血糖值的比对

第三章 结果讨论

3.1 HPLC-MS检测方法

3.2 泪液的收集

3.3 泪糖浓度分析

3.4 展望

结论

致谢

参考文献

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