日本血吸虫单克隆抗抗独特型抗体NP48可变区基因克隆及双链抗体的构建、表达与初步鉴定

摘要

为了拓展NP48—该课题组有自主知识产权的抗体的应用范围,如将来构建用于诊治血吸虫病的双功能抗体,该课题在参照国内外相关研究的基础上,设计并完成了以下研究内容:1.设计通用引物,扩增单克隆抗体NP48的可变区基因,经亚克隆、测序鉴定其序列,与多个数据库比对,进行序列分析,排除假基因.2.设计引物,扩增NP48双链抗体基因,经亚克隆、测序鉴定其序列.构建NP48双链抗体基因的原核分泌型表达系统,分离可溶性表达产物与包涵体,鉴定其中目的蛋白的表达.对包涵体进行变性、纯化与复性处理,用Dot-ELISA初步鉴定.经序列分析证明,体外扩增所得的V<,L>、V<,H>基因为日本血吸虫单克隆anti-anti-id NP48的可变区基因.所构建的NP48的单特异性双链抗体基因的表达产物具有亲本单抗的特异性和亲和力.该部分研究再次证实了获得的可变区基因为NP48的功能性可变区基因.该部分研究对用于血吸虫病诊治的双功能抗体的构建,既准备了候选分子又在方法上具有重要指导意义.

目录

英文缩略词

前言

研究一日本血吸虫单克隆anti-anti-id NP48可变区基因的体外扩增、克隆及序列分析

研究二日本血吸虫抗抗独特型抗体NP48双链抗体(Diabody)的构建、表达与初步鉴定

材料与方法

结果

讨论

小结

参考文献

附录：NP48可变区基因在GenBank数据库中登录

致谢

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