日本血吸虫抗独特型抗体NP30抗体检测法在云南大山区流行现场应用的研究

摘要

血吸虫病是一种严重危害人类健康的人兽共患寄生虫病，以病原学检查为确诊的依据。由于病原学检查在轻度感染者和晚期病人中漏检率很高，而且费时、费力难以现场大规模应用，所以寻找能够准确、方便、适用于现场的大规模普查血吸虫病的诊断方法一直是血防研究的热点课题。 目前，免疫学诊断方法已经广泛应用。最早使用的有皮试法(intracemaltest，IDT)，因其敏感性和特异性均较差，目前应用已不多。循环抗原(circulatingantigen，CAg)检测理论上有疗效考核价值，但CAg在体内很快被清除或形成免疫复合物，有人认为不能作为恒定的检测靶目标。经典的抗体检测方法由于治愈后抗体在血清中长期存在，不能区分现症感染和既往感染，难以考核治疗效果。因此，有人提出一种治疗后能消失较快的短程抗体用于疗效考核，这引起了广大学者的兴趣。 管晓虹等建立了一株日本血吸虫单克隆抗独特型抗体，命名为NP30[4]。经鉴定抗体同型为IgM，是日本血吸虫肠相关抗原(GAA)的内影像，具有与循环抗原(CAg)相似的疗效考核价值，可替代虫源性抗原用于血吸虫病免疫诊断。同时，NP30用于湖沼型流行区如湖南、湖北、江西、安徽等地，取得了良好的效果。由于日本血吸虫不同地理株所引起的免疫应答可能不同，因此本研究探讨了NP30抗体检测法(间接法ELISA)用于云南大山区血吸虫病流行现场的可行性。 研究方法1.选点选择云南省大理白族自治州巍山县鼠街乡鼠街行政村的沿朱什河谷分布的鼠街、杜玛、谷目底三个自然村(该地区为血吸虫病重度流行区，且已8年未曾进行血吸虫病全民防治工作)。以检测点全部503位0～70岁的村民作为调查对象，对其逐一进行血吸虫病病史个案调查，填写个案调查表；收集粪便标本；抽取静脉血液标本，分离血清。 取非血吸虫病流行区山东滨州门诊病人血清100份。 2.病原学检测对收集的粪便用Kato-Katz法(三片)和粪便孵化法(全粪孵化)分别进行检测。 3.免疫学检测采集的血清样本分别用NP30抗体检测法(间接ELISA法)和深圳康百德公司试剂盒(间接SEA/ELISA法)进行检测。 研究结果1.病原学检查结果粪便孵化法检查阳性率为32.41﹪(163/503)；Kato-Katz法(三片)检查阳性率为23.45﹪(118/503)。其中，EPG＜10的占79.66﹪(94/118)，EPG为11～100的占17.80﹪(21/118)，EPG＞100的仅占2.54﹪(3/118)。Kato-Katz法与粪便孵化法的阳性符合率为58.28﹪(95/163)。 2.免疫学检测结果NP30抗体检测法(间接ELISA法)检测粪孵阳性血吸虫病人血清敏感性为87.73﹪(143/163)，特异性为96﹪(96/100)；粪孵阴性人群血清检出率为44.71﹪(152/340)。NP30抗体检测法检测Kato-Katz阳性血吸虫病人血清敏感性为84.75﹪(100/118)；Kato-Katz阴性人群血清检出率为50.65﹪(195/385)。 深圳康百德公司试剂盒(SEA间接ELISA法)检测粪孵阳性血吸虫病人血清敏感性为85.28﹪(139/163)(表4)，特异性为94﹪(94/100)；粪孵阴性人群血清检出率为74.41﹪(253/340)。深圳康百德公司试剂盒检测Kato-Katz阳性血吸虫病人血清敏感性为87.29﹪(103/118)；Kato-Katz阴性人群血清检出率为75.07﹪(289/385)。 3.统计学分析经χ2检验：NP30抗体检测法与SEA/ELISA之间敏感性和特异性均无显著性差异(P＞0.05)；粪孵或Kato-Katz阴性人群血清检出率两种方法之间存在显著性差异(P＜0.01)；粪便孵化法与Kato-Katz法的检测结果有显著性差异(P＜0.01)。 结论1.NP30抗体检测法与经典法具有相似的敏感性和特异性，可用于大山区血吸虫病流行现场。 2.推测NP30抗体检测法的疗效考核价值优于SEA/ELISA法，这是因为NP30检测系统在血吸虫病流行区粪检阴性人群中抗体阳性率明显低于经典SEA/ELISA法。在这一人群中应包括假阴性(低感染度)人群和已经治愈的人群。由于从前的研究已经证明NP30具有与循环抗原(CAg)相同的疗效考核价值，可以排除部分已经治愈的病人。因此推测NP30疗效考核价值优于经典抗体检测法。

目录

前言

材料与方法

结果

讨论

研究小结

参考文献

致谢

日本血吸虫病免疫诊断用抗原的研究进展

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