HSP90调控蛋白HBP21在人视网膜色素上皮细胞中的表达

摘要

目的：研究热休克蛋白HSP90以及HBP21在ARPE19细胞中的表达及二者之间的相互作用，并进一步探讨了HSP90与HBP21相互作用的位点。 方法：首先，通过RT-PCR研究生理状态下二者在ARPE19细胞中的表达。然后构建PGBKT7-HBP21的诱饵基因，进行酵母双杂交发现HSP90与HBP21之间存在相互作用，再诱导6His-HSP90蛋白以及GST-HBP21融合蛋白，通过GST Pull-Down进一步验证三者之间的相互作用。此外还通过构建不同片段的HSP90及HBP21载体进行实验，研究其具体作用位点。 结果：生理状态下，在人的RPE细胞中两者都有一定水平的表达。通过酵母双杂交和GST Pull-Down证实HSP90与HBP21可以相互作用，不同片段的HSP90与HBP21的相互作用表明HBP21通过其三联TPR结构域与HSP90的C端结构域发生相互作用。 结论：HSP90是热休克蛋白家族中的主要成员，具有广泛的生理功能，可参与调节多种蛋白质在非应激条件下的生物活性。然而，对HSP90的胞内作用底物以及细胞中调节因子的有无，只有框架性的了解。我们克隆了一个新的TPR蛋白HBP21，从线虫到小鼠中都发现类似蛋白的表达，然其具体生物学功能尚无详细研究。本研究通过酵母双杂交和GST Pull-Down证实HSP90与HBP21之间可以发生相互作用，且其作用位点为三联TPR结构域及HSP90的C端结构域。RT-PCR表明生理状态下，人RPE细胞中两者都有一定水平的表达。本研究为进一步研究HBP21这个新基因的功能奠定了基础，并且二者在RPE细胞中的表达说明其相互作用可能对RPE增生相关眼病的生理病理过程产生影响。

目录

声明

摘要

前言

材料和方法

结果

分析与讨论

小结

参考文献

附图

附录 英文缩写及中英文全名对照表

致谢

综述 热休克蛋白HSP90在眼科疾病中的研究